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含笑~

银虫 (正式写手)

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[交流] DNA无主条带

提取污水中的总基因组DNA，共6个样，可无主条带，原因何在呢？用的 OMEGA 的kit,用lysozyme和SDS 破壁，然后RNAase除RNA，最后通过柱子回收DNA. 像这样的条带能P出来吗？

[ Last edited by 含笑~ on 2009-4-7 at 09:43 ]

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1楼 2009-04-07 09:42:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

含笑~

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引用回帖:

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-4-7 17:00:

操作的时候轻柔点就可以了，减少用枪吹打，可以用弹管壁等方法混匀
加RNase处理一下就可以去除RNA，但一般无需这么纠结……

至于楼上说的不是DNA而是RNA，其实因为你说是10~20kb之间，那么应该就是DNA了， ...

操作时，有时用枪吹打，有时用涡旋，不知哪种更能保证DNA 的完整性。加过RNAase 的，呵呵。P了下，目的条带很亮，但阴性对照也出条带了，marker之后是阴性对照。谢谢你的热心！

[ Last edited by 含笑~ on 2009-4-8 at 09:39 ]