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含笑~

银虫 (正式写手)

[交流] DNA无主条带

提取污水中的总基因组DNA,共6个样,可无主条带,原因何在呢?用的 OMEGA 的kit,用lysozyme和SDS 破壁,然后RNAase除RNA,最后通过柱子回收DNA. 像这样的条带能P出来吗?

[ Last edited by 含笑~ on 2009-4-7 at 09:43 ]
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含笑~

银虫 (正式写手)

谢谢三磷酸腺苷!
基因组DNA在10k-20k bp 间,要p的目的条带200bp左右,准备先p下试试。不解拖尾的是什么,需要买纯化试剂盒纯化吗

[ Last edited by 含笑~ on 2009-4-7 at 12:17 ]
3楼2009-04-07 12:15:53
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查看全部 9 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢,欢迎常来生物版~ 4-7 12:51
可以了~~
看你要P多长的片段,只要是不超过你模板长度的片段绝对可以
2楼2009-04-07 11:44:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


350784478(金币+1):谢谢
拖尾是基因组断裂现象,很正常的
反复冻融也会
无需进一步纯化
4楼2009-04-07 12:30:00
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含笑~

银虫 (正式写手)

回复三磷酸腺苷

回复三磷酸腺苷,是提取后马上电泳的,没冻融过,这样的话就是提取过程中DNA已经断裂了,怎样才能改善呢,PS:怎样区分是否有RNA杂质
5楼2009-04-07 14:39:49
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