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含笑~

银虫 (正式写手)

[交流] DNA无主条带

提取污水中的总基因组DNA,共6个样,可无主条带,原因何在呢?用的 OMEGA 的kit,用lysozyme和SDS 破壁,然后RNAase除RNA,最后通过柱子回收DNA. 像这样的条带能P出来吗?

[ Last edited by 含笑~ on 2009-4-7 at 09:43 ]
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

你这个DNA根本就没提出来,至少在gel上是看不到的,smear的条带是降解的RNA
OMEGA这个试剂盒根本不是进口的是国内南方的一个私人人的生物公司,几年前就有那时候打电话问一些相关的技术问题,电话始终打通不了,所以,建议你还是别用这个试剂盒,当然了,这些都是个人观点,仅供参考

[ Last edited by sutao1979 on 2009-4-7 at 16:54 ]
会当凌绝顶,一览众山小
6楼2009-04-07 16:50:04
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢,欢迎常来生物版~ 4-7 12:51
可以了~~
看你要P多长的片段,只要是不超过你模板长度的片段绝对可以
2楼2009-04-07 11:44:17
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含笑~

银虫 (正式写手)

谢谢三磷酸腺苷!
基因组DNA在10k-20k bp 间,要p的目的条带200bp左右,准备先p下试试。不解拖尾的是什么,需要买纯化试剂盒纯化吗

[ Last edited by 含笑~ on 2009-4-7 at 12:17 ]
3楼2009-04-07 12:15:53
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


350784478(金币+1):谢谢
拖尾是基因组断裂现象,很正常的
反复冻融也会
无需进一步纯化
4楼2009-04-07 12:30:00
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