应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 农杆菌转化问题
51/1返回列表
查看: 6321  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

du20131580

金虫 (正式写手)

[求助] 农杆菌转化问题 已有4人参与

如题，最近一周都在做农杆菌转化，用的是GV3101感受态细胞，转的是pGreen0800–LUC载体带目的基因。抗性利福平和卡那，培养基50ml每次各加20-50mg的量，封口膜封起放28℃培养48小时，大多数一直不长点，要么就是培养皿边沿长霉菌，完了菌上还有白色的小虫子，重复了至少三次，转化的空载也不长，但是实验室其他人有长得正常的板子，培养基，抗生素也换了新的，还是不长菌，这个可能是什么原因哦，要怎么改善，求教大神解惑(?﹏?)

@飞约疯人院 @biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-09-09 20:06:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
du20131580(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-10-16 10:29:07
我们只能根据只言片语判断，觉得最好的办法是，你跟着你实验室有成功经验的人，两人同时做一遍。
这样更有利于你问题的解决和实验技术的提高
赞一下 回复此楼
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-09-09 23:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

心安洲

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
du20131580(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-10-16 10:29:18
要不要试试液体lb培养基，我也是摇过gv3101  lb试管里五毫升加抗生素放摇床  别用固体培养基，抗生素配成液体一次50u
赞一下 回复此楼
3楼2018-10-16 09:09:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

菌株应该没问题，因为实验室别人也用了，那是否是质粒的问题，质粒可以再送去测下序，看看是不是你所说的质粒有问题
赞一下 回复此楼
4楼2018-10-16 12:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhz0809

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

pGreen0800–LUC建议使用带pSoup质粒的农杆菌进行复制，
如GV3101(pSoup)
在GV3101菌株中转入help质粒：pSoup，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
GV3101(pSoup-p19)
在GV3101菌株中转入help质粒：pSoup-p19，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
GV3101(pJIC SA_Rep)
含辅助质粒：pJIC SA_Rep，可帮助pgR106，pgR107，pGreen，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
EHA105(pSoup)
在EHA105菌株中转入help质粒：pSoup，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
AGL1(pSoup)
赞一下(4人) 回复此楼
5楼2018-10-30 13:14:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 du20131580 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:52 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭