应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 农杆菌转化问题
51/1返回列表
查看: 6317  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

du20131580

金虫 (正式写手)

[求助] 农杆菌转化问题 已有4人参与

如题，最近一周都在做农杆菌转化，用的是GV3101感受态细胞，转的是pGreen0800–LUC载体带目的基因。抗性利福平和卡那，培养基50ml每次各加20-50mg的量，封口膜封起放28℃培养48小时，大多数一直不长点，要么就是培养皿边沿长霉菌，完了菌上还有白色的小虫子，重复了至少三次，转化的空载也不长，但是实验室其他人有长得正常的板子，培养基，抗生素也换了新的，还是不长菌，这个可能是什么原因哦，要怎么改善，求教大神解惑(?﹏?)

@飞约疯人院 @biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-09-09 20:06:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
du20131580(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-10-16 10:29:07
我们只能根据只言片语判断，觉得最好的办法是，你跟着你实验室有成功经验的人，两人同时做一遍。
这样更有利于你问题的解决和实验技术的提高
赞一下 回复此楼
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-09-09 23:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

心安洲

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
du20131580(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-10-16 10:29:18
要不要试试液体lb培养基，我也是摇过gv3101  lb试管里五毫升加抗生素放摇床  别用固体培养基，抗生素配成液体一次50u
赞一下 回复此楼
3楼2018-10-16 09:09:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

菌株应该没问题，因为实验室别人也用了，那是否是质粒的问题，质粒可以再送去测下序，看看是不是你所说的质粒有问题
赞一下 回复此楼
4楼2018-10-16 12:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhz0809

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

pGreen0800–LUC建议使用带pSoup质粒的农杆菌进行复制，
如GV3101(pSoup)
在GV3101菌株中转入help质粒：pSoup，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
GV3101(pSoup-p19)
在GV3101菌株中转入help质粒：pSoup-p19，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
GV3101(pJIC SA_Rep)
含辅助质粒：pJIC SA_Rep，可帮助pgR106，pgR107，pGreen，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
EHA105(pSoup)
在EHA105菌株中转入help质粒：pSoup，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制
AGL1(pSoup)
赞一下(4人) 回复此楼
5楼2018-10-30 13:14:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 du20131580 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭