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qq247575804

金虫 (正式写手)

[交流] 【请教】请教大家一个关于酶活性检测的问题 ^_^

我想请问各位兄弟姐妹：
我最近需要进行一些放线菌内的酶的活性检测 使用紫外分光光度法来检测  比如检测分支酸变位酶的活性吧  我看到许多文献中讲了有关它的检测方法  可是在检测过程中文献均省略了粗酶制备液的制备过程，我的发酵液非常的粘稠 由于酶的活性受许多因素的影响  所以在制备粗酶液的时候得保持其正常的活性 否则检测出来也不准了。我想请问大家：是否有做过酶检测的呀？我现在想知道你们的粗酶制备过程
是不是一般都是取发酵液，置于缓冲溶液中 然后超声波破碎 再离心 最好取上清液吗？ 这样子行吗？
谢谢各位！
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好好珍惜所拥有的！
1楼 2009-04-05 22:16:52
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litanyao1104

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+0,VIP+0):欢迎常来，生物材料版期待您更多的参与~~ 6-11 11:46
我们的酶都是直接买来的，老乡，帮不上忙啊~~~
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3楼2009-05-26 21:12:41
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傻娃娃80

金虫 (小有名气)

我也想知道酶得提取方法

薰衣草儿(金币+0,VIP+0):欢迎常来，生物材料版期待您更多的参与~~ 6-11 11:46
我也想知道酶的提取方法，希望赐教！万分感激！
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2楼2009-04-06 17:31:28
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seapine

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论 5-26 22:44
呵呵，利用酶的很多，用标准方法测酶活，自己做酶，测酶活的方法应该一样吧，或者是同购买的比较一下就可以了
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4楼2009-05-26 22:24:03
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dongchao

金虫 (小有名气)

发酵液处理

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论 6-6 21:50
一般细胞外酶的测定采用离心或过滤,胞内要加一步破碎,这都是常规实验,没有什么难点.关键看你的酶测定方法是否受其它成份的影响,如色素会影响比色法,而生物活性法就不受 色素影响.你的实验如果用紫外比色,最好针对发酵液做盐析或超滤等进一步提取,有助于准确性提高.
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5楼2009-06-06 18:22:05
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