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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 转化大肠杆菌相关问题
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sunxin1234

新虫 (初入文坛)

[求助] 转化大肠杆菌相关问题 已有1人参与

没有菌落啊！！！！！
感受态细胞是刚买的，方法也是按照常规方法。只是在涂平板之前没有离心，不过这应该没有什么影响吧，只是浓度问题吧。公司合成的质粒，回来直接无菌水配成的10ng/ul，加了10ul，100ul的感受态。为啥就是不长啊。。。。??????

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1楼 2018-08-27 09:01:06
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走走停停0

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+2, 鼓励交流 2018-08-27 18:56:48
这种情况，可能有三种原因：
1.质粒没转进去，可以检查一下转化的过程，尽量在转化的时候小心一点，不要把感受态摇死。
2.浓度太低，可能也会有影响。尽量离心完再涂板。
3.感受态本身可能有问题，检查一下，重复几遍实验。
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2楼2018-08-27 09:42:56
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sunxin1234

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 走走停停0 at 2018-08-27 09:42:56
这种情况，可能有三种原因：
1.质粒没转进去，可以检查一下转化的过程，尽量在转化的时候小心一点，不要把感受态摇死。
2.浓度太低，可能也会有影响。尽量离心完再涂板。
3.感受态本身可能有问题，检查一下，重复 ...

刚刚看了下板，只有三个菌落先挑单克隆看看能不能长起来。

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3楼2018-08-27 17:44:48
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Baihuteng

新虫 (初入文坛)
42度，45秒？

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4楼2018-08-28 09:27:29
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水炎欢欢

禁虫 (知名作家)
本帖内容被屏蔽
5楼2018-08-29 08:38:25
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Cherishqj

铜虫 (小有名气)
我最近也在做转化，每次连接2管，最后总共长5、6个单菌落，PCR验证都是假阳性，做了好几遍了好心塞啊
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6楼2018-08-30 21:37:58
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兜转十年

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
7楼2018-08-31 14:51:34
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昵称为昵称

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
8楼2018-09-01 00:35:44
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