24小时热门版块排行榜    

查看: 3320  |  回复: 12
【悬赏金币】回答本帖问题,作者wdd608将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wdd608

新虫 (初入文坛)

[求助] 乙醇浓缩DNA已有2人参与

用试剂盒提出来DNA之后,浓度很低,于是通过乙醇沉淀DNA的方法来浓缩DNA,想让DNA浓度提高,这是步骤:
1.按照待沉淀溶液体积的1/10添加3M的NaAc溶液(醋酸钠),同时按照溶液体积的2-2.5倍添加无水乙醇,充分振荡混匀。(1ml溶液加入100ulNaAC溶液和2-2.5ml无水乙醇,顺序不可颠倒)
2.-20静置20min(可长期保存)
3.12000rpm 离心 20min
4.去上清,加入70%乙醇1ml洗涤(沉淀多可以增加体积),稍加振荡后离心,12000rpm,10min
5.重复(步骤4)2-3次
6.去上清,瞬时离心将残余70%乙醇甩到管底,移液器吸净上清
7.开盖风干5min,注意没有醇味即可,不要过干
8.纯水适当体积溶解(尽量少),注意:很多沉淀会附在管壁,注意溶解时反复吹打相应扇面的管壁。
但是第3步的时候根本没有沉淀,硬着头皮做下来,检测发现就只有水,浓度在0.3左右,请问是怎么回事?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WEEEEEE

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确定你的菌没有被污染吗
3楼2018-08-27 12:19:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

602059625

金虫 (知名作家)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-31 08:23:54
要浓缩,真空抽干就可以,
乙醇沉淀也会损失一点,通常要DNA浓度较高才用乙醇

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
2楼2018-08-27 01:54:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdd608

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 602059625 at 2018-08-27 01:54:40
要浓缩,真空抽干就可以,
乙醇沉淀也会损失一点,通常要DNA浓度较高才用乙醇

真空抽干也看到别人提过,具体操作是什么呢?是不是必须得有个仪器。
4楼2018-08-29 16:33:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

balalalabala

新虫 (小有名气)

冷冻干燥试一试,就是需要有仪器
5楼2018-08-29 19:21:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 化学B02口青基 代表作都是什么水平的?向大佬求助 +12 arthas_007 2024-06-01 14/700 2024-06-02 16:18 by 夏木荫浓
[基金申请] 九部门发文:不得将专利授权数量作为人才评价、项目评审、职称评定、高校评价等的条件 +17 sjtu2012 2024-05-28 21/1050 2024-06-02 13:43 by 欢乐颂叶蓁
[基金申请] 入职高校3年发表10+SCI,尽人事听天命 +33 kaoyan250 2024-05-27 44/2200 2024-06-02 13:06 by 苏东坡二世
[考博] 求25博导,金属增材制造方向 +3 22机械 2024-06-01 3/150 2024-06-02 11:17 by Napoleonsky
[教师之家] 职能部门工作人员态度不好是普遍的吗?怎么让他们态度好一些? +4 河西夜郎 2024-06-01 4/200 2024-06-02 09:14 by 摩天思瑞
[教师之家] 博士高校求职 安建大vs西科大 +4 chengmy19 2024-06-01 10/500 2024-06-02 06:54 by icm639
[基金申请] B口人才项目 +9 WOWO159357 2024-05-29 19/950 2024-06-01 14:24 by linxuhuizj
[论文投稿] 求Sci期刊推荐 10+4 甄小鱼 2024-05-30 7/350 2024-06-01 10:41 by bobvan
[基金申请] 数理的人才答辩通知发了吗 +7 yzy3327 2024-05-30 7/350 2024-06-01 09:15 by 撒哈拉西部
[考博] 申博求助?本硕双非一篇三区和四区去985工科非天坑专业有没有希望? +4 LYS1200 2024-05-29 6/300 2024-06-01 08:50 by 学术渣渣神
[文学芳草园] 对对子啊 +5 天若孤独 2024-05-29 7/350 2024-05-31 09:00 by wjykycg
[文学芳草园] 物是人非 +4 myrtle 2024-05-30 4/200 2024-05-30 15:05 by mapenggao
[论文投稿] 审稿专家比较坚定的让补充实验,但实在没法补充实验,修回还有希望吗? (EPI+1) 3+3 qweasd12345 2024-05-29 6/300 2024-05-30 08:11 by qweasd12345
[论文投稿] 有没有老师需要发表论文 +4 金老师论文助理- 2024-05-29 4/200 2024-05-29 16:51 by liuyupu132
[基金申请] 信息学部函评结束了吗? +6 ducan21 2024-05-28 7/350 2024-05-29 12:10 by WORLD0256
[论文投稿] 高手朋友推荐比较容易投稿和录用的SCI期刊,不投稿收费SC,对分区没有要求 5+3 xintangren 2024-05-28 4/200 2024-05-29 10:46 by xintangren
[论文投稿] 核心初审被拒,理由是“选题的意义不明确,文章写得不像是科技论文”,怎么改 5+3 工藤雷花樱 2024-05-27 8/400 2024-05-29 10:09 by topedit
[基金申请] 如果您是国自然评审专家 +3 丁香园账户 2024-05-28 3/150 2024-05-29 06:44 by gaohui8888
[基金申请] E05青基有几个评审 +4 KYXY123 2024-05-28 4/200 2024-05-28 19:25 by popt2t
[有机交流] 机理求助 120+4 15147165026 2024-05-26 10/500 2024-05-28 14:42 by 江东闲人
信息提示
请填处理意见