| 查看: 2138 | 回复: 57 | |||
[交流]
如何使用小分子标签在不融合多肽片段的情况下标记蛋白质分子
|
|||
|
想和虫友们交流一下蛋白质标记的问题。蛋白质标记嘛，顾名思义，通过给蛋白质加一个标签来显示目标蛋白质的表达，结构和功能特性，常用的标签是荧光标记。 简单的说，我想要给我感兴趣的蛋白质加一个荧光标签，这样我就可以观察这个蛋白质在细胞内的表达和分解情况。我知道目前常用的标签有荧光蛋白融合表达和抗体免疫反应法，然而这个两个方法我都不喜欢。 首先荧光蛋白融合表达我没法用。GFP和它的variants都太大了，有30kDa上下，我的目标蛋白在细胞内是有特定功能的，拖着这么个大家伙，其功能必受影响。并且，在末端加多肽片段会影响我目标蛋白质的稳定性，让它表现不自然。因此排除这个方法。 第二个方法嘛，比较依赖抗体，抗原/一扛的特异性很难保证。另外就是抗原在细胞体内，一/二抗是大分子蛋白质，他们进入细胞的前提是给细胞做穿透，这个穿透的效率是难以保证的。不可控因素较多，我不喜欢这个方法。 所以我想要问的是，有没有虫友做的课题里面涉及到了小分子label蛋白质的方法，如果有的话请您描述一下。我找到的小分子label要么是特异性都不好，识别多种相近短肽片段。要么就是含有特异性结构的蛋白质识别片段过长。如何才能让小分子label在不添加peptide tag的情况下直接识别我的目标蛋白本身呢？ 研究遇到了问题，我猜想自己可能入陷入了自相矛盾的循环之中。因此，我希望看到帖子的您能帮我思考一下这个问题。 |
回复此楼» 猜你喜欢
自荐读博
已经有9人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
-
自然科学基金委宣布启动申请书“瘦身提质”行动
已经有4人回复
-
求个博导看看
已经有18人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
中科院长春光机所 招收计算材料学博士/硕士研究生（含机器学习辅助材料设计方向）
+1/80
-
成都理工大学全国重点实验室公开诚聘绿色有机合成方向联培生及科研助理
+1/79
-
上海大学管理学院阳发军教授课题组全职博士/博士后招聘启事
+1/78
-
希望你在这里
+1/71
-
中国科学院深海所 招收2026秋入学博士生1名 申请-考核制
+1/44
-
南科大薛亚辉课题组诚聘离子输运、低维器件、原子力显微镜等方向“快响行动”博士生
+1/44
-
华中科技大学龚江研究员课题组诚招博士研究生、科研助理和博士后
+2/40
-
北京林业大学木质素高值化利用创新团队招收2026年入学博士生
+1/32
-
2026年黄河科技学院纳米功能材料研究所招聘
+2/26
-
上海大学昝鹏教授、军事医学研究院伯晓晨研究员/倪铭副研究员 课题组招聘博士生
+2/26
-
Journal of Agricultural and Food Chemistry登不上
+1/16
-
博士/硕士招生
+1/11
-
从业之感悟
+2/8
-
国家级人才课题组招收2026年入学博士
+1/7
-
废旧塑料热解油采购
+1/6
-
上海大学昝鹏教授、军事医学研究院伯晓晨研究员/倪铭副研究员 课题组招聘博士生
+2/6
-
澳门科技大学诚招纳米材料/水凝胶方向博士研究生（2026年秋-updated）
+1/5
-
上海理工大学“新能源材料”专业-赵斌教授招收申请考核制博士生【能源催化方向】
+1/3
-
英国博导招CSC博士生
+1/2
-
Discussion最难写？因为没有用对工具吧。
+1/1
4楼2018-08-11 02:24:39
8楼2018-08-11 07:20:00
13楼2018-08-11 07:37:50
14楼2018-08-11 07:38:06
28楼2018-08-11 09:29:43
★
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
|
本帖内容被屏蔽 |
31楼2018-08-11 09:53:17
32楼2018-08-11 10:07:28
41楼2018-08-11 11:45:56
:: 47楼2018-08-11 12:48:22
简单回复
2018-08-11 00:49
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
xhmaohan3楼
2018-08-11 01:01
回复
梦想天行5楼
2018-08-11 06:29
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
2018-08-11 07:06
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
2018-08-11 07:16
回复
鸵辟re99楼
2018-08-11 07:29
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
祝福
心语飞扬11110楼
2018-08-11 07:30
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
ahbvd98811楼
2018-08-11 07:30
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
EGO18212楼
2018-08-11 07:36
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
非谌ws715楼
2018-08-11 07:46
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
eaeer81516楼
2018-08-11 07:55
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
tzynew17楼
2018-08-11 08:05
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
barcarl18楼
2018-08-11 08:15
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
赞 发自小木虫Android客户端
youngen19楼
2018-08-11 08:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
drnky2220楼
2018-08-11 08:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
mhxf79821楼
2018-08-11 08:47
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
客故ts122楼
2018-08-11 08:50
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
mxdfgh8923楼
2018-08-11 09:00
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
slytjiaofei24楼
2018-08-11 09:08
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
egjzgw88425楼
2018-08-11 09:14
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
nrjrku57826楼
2018-08-11 09:27
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
dggww42327楼
2018-08-11 09:27
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
nicenicey29楼
2018-08-11 09:41
回复
nono200930楼
2018-08-11 09:42
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
urrpm13133楼
2018-08-11 10:10
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
tangbohejin34楼
2018-08-11 10:24
回复
vtvzajk65735楼
2018-08-11 10:54
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
rfqwfsd0936楼
2018-08-11 11:01
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
sdwreda23037楼
2018-08-11 11:08
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
edmuvq49238楼
2018-08-11 11:32
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶
psylhh39楼
2018-08-11 11:37
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
钨山ci840楼
2018-08-11 11:43
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
e3853112342楼
2018-08-11 12:03
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
n1130165543楼
2018-08-11 12:06
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
n0252982944楼
2018-08-11 12:07
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
a6184941545楼
2018-08-11 12:31
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
c1540533246楼
2018-08-11 12:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶
sz_kebaoyuan48楼
2018-08-11 13:21
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
Biotage49楼
2018-08-11 13:35
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
三八洲50楼
2018-08-11 13:41
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与