| 查看: 2157 | 回复: 57 | |||
[交流]
如何使用小分子标签在不融合多肽片段的情况下标记蛋白质分子
|
|||
|
想和虫友们交流一下蛋白质标记的问题。蛋白质标记嘛，顾名思义，通过给蛋白质加一个标签来显示目标蛋白质的表达，结构和功能特性，常用的标签是荧光标记。 简单的说，我想要给我感兴趣的蛋白质加一个荧光标签，这样我就可以观察这个蛋白质在细胞内的表达和分解情况。我知道目前常用的标签有荧光蛋白融合表达和抗体免疫反应法，然而这个两个方法我都不喜欢。 首先荧光蛋白融合表达我没法用。GFP和它的variants都太大了，有30kDa上下，我的目标蛋白在细胞内是有特定功能的，拖着这么个大家伙，其功能必受影响。并且，在末端加多肽片段会影响我目标蛋白质的稳定性，让它表现不自然。因此排除这个方法。 第二个方法嘛，比较依赖抗体，抗原/一扛的特异性很难保证。另外就是抗原在细胞体内，一/二抗是大分子蛋白质，他们进入细胞的前提是给细胞做穿透，这个穿透的效率是难以保证的。不可控因素较多，我不喜欢这个方法。 所以我想要问的是，有没有虫友做的课题里面涉及到了小分子label蛋白质的方法，如果有的话请您描述一下。我找到的小分子label要么是特异性都不好，识别多种相近短肽片段。要么就是含有特异性结构的蛋白质识别片段过长。如何才能让小分子label在不添加peptide tag的情况下直接识别我的目标蛋白本身呢？ 研究遇到了问题，我猜想自己可能入陷入了自相矛盾的循环之中。因此，我希望看到帖子的您能帮我思考一下这个问题。 |
回复此楼» 猜你喜欢
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有8人回复
-
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有23人回复
-
最失望的一年
已经有5人回复
-
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有20人回复
-
26申博
已经有3人回复
-
请教限项目规定
已经有3人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有10人回复
-
基金申报
已经有6人回复
-
推荐一本书
已经有13人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
保障电池制造超纯环境：威格科技电池生产全线解决方案
+1/89
-
南昌大学化学化工学院付拯江教授拟招收“申请-考核”制博士研究生
+1/86
-
深圳大学水科学中心HydroS课题组招收化学/环境相关专业博士生1名（2026年入学）
+1/81
-
哈尔滨工业大学王东博课题组/中科院上海微系统所梁丽娟课题组招收2026年博士生1名
+1/79
-
信息工程大学教授团队网络空间安全专业博士招生【2026年1月31日报名截止】
+1/77
-
26博士申请-药物化学方向
+1/75
-
招聘：中国科学院山西煤炭化学研究所
+1/74
-
中国地质大学（武汉）地质学、地质资源与地质工程、资源与环境方向招生，请尽快联系！
+1/73
-
中国地质大学（武汉）地质学、地质资源与地质工程、资源与环境方向招生，请尽快联系！
+1/58
-
[长期合作招募] 同济大学肖倩老师团队诚邀港澳学者学术交流
+1/40
-
Win10系统Xshell窗口小、无法移动、不显示工具栏的一个解决办法
+1/38
-
悉尼大学 AMME 机械工程 双ARC Future Fellows团队招收CSC博士生
+1/29
-
26博士申请-药物化学方向
+2/24
-
中国科学院大连化学物理研究所-环境催化工程研究组（DNL 902组）事业编外项目聘用人员
+2/20
-
浙江大学信息光子材料与器件实验室诚聘博士后、科研助理
+1/16
-
南京邮电大学-材料院尹超教授课题组-诚聘材料、化学、生物医学博士后（长期有效）
+1/8
-
香港科技大学 招生 2026 Fall全奖博士 -- 机械/电子/材料/化学
+1/8
-
科研党/导师看过来，强推这个自带“引文验真”的国产工具，改作业效率翻倍
+1/5
-
【博士后/科研助理招聘-北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队】
+1/3
-
中科院理化所热声热机团队招聘电气工程专业(电机方向)博士后/特别研究助理
+1/2
4楼2018-08-11 02:24:39
8楼2018-08-11 07:20:00
13楼2018-08-11 07:37:50
14楼2018-08-11 07:38:06
28楼2018-08-11 09:29:43
★
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
|
本帖内容被屏蔽 |
31楼2018-08-11 09:53:17
32楼2018-08-11 10:07:28
41楼2018-08-11 11:45:56
:: 47楼2018-08-11 12:48:22
简单回复
2018-08-11 00:49
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
xhmaohan3楼
2018-08-11 01:01
回复
梦想天行5楼
2018-08-11 06:29
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
2018-08-11 07:06
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
2018-08-11 07:16
回复
鸵辟re99楼
2018-08-11 07:29
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
祝福
心语飞扬11110楼
2018-08-11 07:30
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
ahbvd98811楼
2018-08-11 07:30
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
EGO18212楼
2018-08-11 07:36
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
非谌ws715楼
2018-08-11 07:46
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
eaeer81516楼
2018-08-11 07:55
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
tzynew17楼
2018-08-11 08:05
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
barcarl18楼
2018-08-11 08:15
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
赞 发自小木虫Android客户端
youngen19楼
2018-08-11 08:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
drnky2220楼
2018-08-11 08:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
mhxf79821楼
2018-08-11 08:47
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
客故ts122楼
2018-08-11 08:50
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
mxdfgh8923楼
2018-08-11 09:00
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
slytjiaofei24楼
2018-08-11 09:08
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
egjzgw88425楼
2018-08-11 09:14
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
nrjrku57826楼
2018-08-11 09:27
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
dggww42327楼
2018-08-11 09:27
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
nicenicey29楼
2018-08-11 09:41
回复
nono200930楼
2018-08-11 09:42
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
urrpm13133楼
2018-08-11 10:10
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
tangbohejin34楼
2018-08-11 10:24
回复
vtvzajk65735楼
2018-08-11 10:54
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
rfqwfsd0936楼
2018-08-11 11:01
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
sdwreda23037楼
2018-08-11 11:08
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
edmuvq49238楼
2018-08-11 11:32
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶
psylhh39楼
2018-08-11 11:37
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
钨山ci840楼
2018-08-11 11:43
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
e3853112342楼
2018-08-11 12:03
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
n1130165543楼
2018-08-11 12:06
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
n0252982944楼
2018-08-11 12:07
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
a6184941545楼
2018-08-11 12:31
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
c1540533246楼
2018-08-11 12:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶
sz_kebaoyuan48楼
2018-08-11 13:21
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
Biotage49楼
2018-08-11 13:35
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
三八洲50楼
2018-08-11 13:41
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与