| 查看: 2431 | 回复: 57 | |||
[交流]
如何使用小分子标签在不融合多肽片段的情况下标记蛋白质分子
|
|||
|
想和虫友们交流一下蛋白质标记的问题。蛋白质标记嘛,顾名思义,通过给蛋白质加一个标签来显示目标蛋白质的表达,结构和功能特性,常用的标签是荧光标记。 简单的说,我想要给我感兴趣的蛋白质加一个荧光标签,这样我就可以观察这个蛋白质在细胞内的表达和分解情况。我知道目前常用的标签有荧光蛋白融合表达和抗体免疫反应法,然而这个两个方法我都不喜欢。 首先荧光蛋白融合表达我没法用。GFP和它的variants都太大了,有30kDa上下,我的目标蛋白在细胞内是有特定功能的,拖着这么个大家伙,其功能必受影响。并且,在末端加多肽片段会影响我目标蛋白质的稳定性,让它表现不自然。因此排除这个方法。 第二个方法嘛,比较依赖抗体,抗原/一扛的特异性很难保证。另外就是抗原在细胞体内,一/二抗是大分子蛋白质,他们进入细胞的前提是给细胞做穿透,这个穿透的效率是难以保证的。不可控因素较多,我不喜欢这个方法。 所以我想要问的是,有没有虫友做的课题里面涉及到了小分子label蛋白质的方法,如果有的话请您描述一下。我找到的小分子label要么是特异性都不好,识别多种相近短肽片段。要么就是含有特异性结构的蛋白质识别片段过长。如何才能让小分子label在不添加peptide tag的情况下直接识别我的目标蛋白本身呢? 研究遇到了问题,我猜想自己可能入陷入了自相矛盾的循环之中。因此,我希望看到帖子的您能帮我思考一下这个问题。 |
» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
fileCode有新解读?
已经有16人回复
售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有4人回复
售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
基金中了
已经有14人回复
关于filecode
已经有7人回复
娱乐
已经有6人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 抢金币啦!回帖就可以得到:
发榜前的“心理过山车”:你经历了吗?
+5/350
三(三甲基硅基)甘油醚(CAS:6787-10-6 )
+1/88
3-丁烯-1-醇(CAS:627-27-0)
+1/88
三(三甲基硅基)硼酸酯(CAS:4325-85-3)
+1/87
乙二醇二甲基环硅醚(CAS:57915-66-9)
+1/87
十二烷基溴化吡啶(CAS:104-73-4)
+1/84
三(三甲基硅烷)磷酸酯(CAS:10497-05-9)
+1/83
南京大学医工交叉方向薛璐璐团队招聘脂质纳米材料与RNA递送方向博士后1-2名
+1/73
新人投稿arxiv 需要cs.IT/CR大佬背书
+1/68
坐标重庆 诚征男友
+1/63
《上海高薪》VS《中科院》
+1/8
夏尽秋来,蓄力沉淀,静待硕果成文
+1/8
中国石油大学(华东)计算机科学与技术学院/智能化新能源系统设计和开发方向 特聘副教
+2/8
瑞典林雪平大学 高峰课题组 诚聘 氮化物基无机材料方向 博士后1名
+1/7
天津大学张小岩教授团队招收2027级推免生(光电子能源、热管理材料与器件、微纳传感)
+1/7
香港理工大学殷骏课题组诚聘1 名博士后以及2 名博士生
+1/5
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/4
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/3
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/2
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/2
4楼2018-08-11 02:24:39
8楼2018-08-11 07:20:00
13楼2018-08-11 07:37:50
14楼2018-08-11 07:38:06
28楼2018-08-11 09:29:43
★
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
|
本帖内容被屏蔽 |
31楼2018-08-11 09:53:17
32楼2018-08-11 10:07:28
41楼2018-08-11 11:45:56
47楼2018-08-11 12:48:22
简单回复
2018-08-11 00:49
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
xhmaohan3楼
2018-08-11 01:01
回复
梦想天行5楼
2018-08-11 06:29
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
2018-08-11 07:06
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
2018-08-11 07:16
回复
鸵辟re99楼
2018-08-11 07:29
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
祝福
心语飞扬11110楼
2018-08-11 07:30
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
ahbvd98811楼
2018-08-11 07:30
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
EGO18212楼
2018-08-11 07:36
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
非谌ws715楼
2018-08-11 07:46
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
eaeer81516楼
2018-08-11 07:55
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
tzynew17楼
2018-08-11 08:05
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
barcarl18楼
2018-08-11 08:15
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
赞 发自小木虫Android客户端
youngen19楼
2018-08-11 08:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
drnky2220楼
2018-08-11 08:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
mhxf79821楼
2018-08-11 08:47
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
客故ts122楼
2018-08-11 08:50
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
mxdfgh8923楼
2018-08-11 09:00
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
slytjiaofei24楼
2018-08-11 09:08
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
egjzgw88425楼
2018-08-11 09:14
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
nrjrku57826楼
2018-08-11 09:27
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
dggww42327楼
2018-08-11 09:27
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
nicenicey29楼
2018-08-11 09:41
回复
nono200930楼
2018-08-11 09:42
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
urrpm13133楼
2018-08-11 10:10
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
tangbohejin34楼
2018-08-11 10:24
回复
vtvzajk65735楼
2018-08-11 10:54
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
rfqwfsd0936楼
2018-08-11 11:01
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
sdwreda23037楼
2018-08-11 11:08
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
edmuvq49238楼
2018-08-11 11:32
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶
psylhh39楼
2018-08-11 11:37
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
钨山ci840楼
2018-08-11 11:43
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
e3853112342楼
2018-08-11 12:03
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
n1130165543楼
2018-08-11 12:06
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
n0252982944楼
2018-08-11 12:07
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
a6184941545楼
2018-08-11 12:31
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
c1540533246楼
2018-08-11 12:33
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶
sz_kebaoyuan48楼
2018-08-11 13:21
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
Biotage49楼
2018-08-11 13:35
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
三八洲50楼
2018-08-11 13:41
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与










回复此楼
::