| 查看: 2570 | 回复: 57 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
如何使用小分子标签在不融合多肽片段的情况下标记蛋白质分子
|
|||
|
想和虫友们交流一下蛋白质标记的问题。蛋白质标记嘛，顾名思义，通过给蛋白质加一个标签来显示目标蛋白质的表达，结构和功能特性，常用的标签是荧光标记。 简单的说，我想要给我感兴趣的蛋白质加一个荧光标签，这样我就可以观察这个蛋白质在细胞内的表达和分解情况。我知道目前常用的标签有荧光蛋白融合表达和抗体免疫反应法，然而这个两个方法我都不喜欢。 首先荧光蛋白融合表达我没法用。GFP和它的variants都太大了，有30kDa上下，我的目标蛋白在细胞内是有特定功能的，拖着这么个大家伙，其功能必受影响。并且，在末端加多肽片段会影响我目标蛋白质的稳定性，让它表现不自然。因此排除这个方法。 第二个方法嘛，比较依赖抗体，抗原/一扛的特异性很难保证。另外就是抗原在细胞体内，一/二抗是大分子蛋白质，他们进入细胞的前提是给细胞做穿透，这个穿透的效率是难以保证的。不可控因素较多，我不喜欢这个方法。 所以我想要问的是，有没有虫友做的课题里面涉及到了小分子label蛋白质的方法，如果有的话请您描述一下。我找到的小分子label要么是特异性都不好，识别多种相近短肽片段。要么就是含有特异性结构的蛋白质识别片段过长。如何才能让小分子label在不添加peptide tag的情况下直接识别我的目标蛋白本身呢？ 研究遇到了问题，我猜想自己可能入陷入了自相矛盾的循环之中。因此，我希望看到帖子的您能帮我思考一下这个问题。 |
回复此楼» 猜你喜欢
40+中年人失业后，还能找到好工作吗？
已经有14人回复
-
二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores
已经有5人回复
-
申请科研项目纯靠实力能成功吗？
已经有12人回复
-
用NBS溴化时溶剂除了CCl4外还有什么
已经有6人回复
-
极限拉扯，如何抉择
已经有15人回复
-
OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？
已经有13人回复
-
课题组会帮你通过考核么？
已经有7人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
4楼2018-08-11 02:24:39
简单回复
xhmaohan3楼
2018-08-11 01:01
回复
梦想天行5楼
2018-08-11 06:29
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
2018-08-11 07:16
回复
心语飞扬11110楼
2018-08-11 07:30
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
EGO18212楼
2018-08-11 07:36
回复
厚德求是(金币+1): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
10