24小时热门版块排行榜    

查看: 466  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sunxiaolin

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助:同源重组问题

各位大侠,有一问题请教,我现在在做中断,用到BW25113这个菌,我将PCR之后的抗性卡壳电转化进入BW中,进行文库质粒与卡壳之间的重组,长出菌落后,进行PCR验证,可是只有一条带,是安普抗性的卡壳没有插入我的基因中的条带,我想问,为什么抗性卡壳没插入文库质粒中,但是在含有安普的平板上却能长出菌落?多谢各位指教!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大飞370

铜虫 (小有名气)

做个空白菌对照,看是否是因为抗生素失效了。有可能是抗生素降解到不足以抑制野生菌生长的浓度了
5楼2009-04-02 18:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

gandalf886

银虫 (小有名气)

是挺卡壳的,BW是什么,安普是什么
2楼2009-04-01 18:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunxiaolin

铜虫 (初入文坛)

BW是一种大肠杆菌,里面含有一个质粒,可以表达重组酶。
安普拉,是一种抗生素
3楼2009-04-02 08:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gandalf886

银虫 (小有名气)

我仔细看了一下,你是想把“安普拉”抗性片段同源重组到文库质粒上。
文库质粒是高拷贝的吧,而同源重组的概率本身又很低,一个“卡壳”可能与BW中的一个文库质粒发生重组,从而使BW具有安普拉抗性;而BW中可能剩余很多质粒是不发生变化的,所以p出来的片段还是跟以前一样啊。
还有,没准安普拉卡壳插到基因组上去了呢。

[ Last edited by gandalf886 on 2009-4-2 at 16:34 ]
4楼2009-04-02 16:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856求调剂 +5 zhn03 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:58 by peike
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 329求调剂 +3 钮恩雪 2026-03-25 3/150 2026-03-25 14:43 by 糖加冰
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +6 @taotao 2026-03-19 6/300 2026-03-25 08:37 by 木托莫露露
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +5 谷雨上岸 2026-03-23 6/300 2026-03-24 16:32 by laoshidan
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap-
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
信息提示
请填处理意见