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sunxin1234

新虫 (初入文坛)

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虫号: 9629693
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专业: 生物物理、生物化学与分子

[求助] 关于克隆表达的一些问题已有1人参与

做rhodanese纯化。通过全基因合成将其表达到大肠杆菌中。载体是pet28a，抗性卡那。有几个问题想请教一下各位大佬。
1 培养时培养基怎么选？LB培养基？加不加抗生素？加的话是加卡那？加多少？摇菌培养的温度，转速，时间是多少？OD值要达到多少？
2 合成的时候，合成了一个带his标签的一个不带的。分离纯化时不带标签的用什么柱子？带标签的用什么柱子？

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1楼 2018-07-26 11:42:18

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macgray11

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
渊博震天: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-07-26 13:53:41
渊博震天: 金币-5, 应助指数-1, 非应助贴请不要点击应助 2018-07-26 13:54:41

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2楼2018-07-26 12:59:15

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sunxin1234

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2楼: Originally posted by macgray11 at 2018-07-26 12:59:15
做rhodanese纯化。通过全基因合成将其表达到大肠杆菌中。载体是pet28a，抗性卡那。有几个问题想请教一下各位大佬。
1 培养时培养基怎么选？LB培养基？加不加抗生素？加的话是加卡那？加多少？摇菌培养的温度， ...

这个公司已经表达好了。我回来好像只需要摇菌培养就可以了吧。。。不用再做诱导表达了吧

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