24小时热门版块排行榜    

查看: 1466  |  回复: 7

赵阿香

新虫 (初入文坛)

[求助] 桃叶绿体DNA提取跑胶条带不清楚不是很亮 已有1人参与

提了很多次叶绿体DNA跑胶都不明显,不是条带拖,是条带根本就不太亮,用百分之1.5的琼脂糖凝胶跑电泳,2μ升的溴酚蓝加7μ升的提出来的DNA样混合点样,就想问一下大神们问题可能出在哪里,是样品量不够吗?还是EB不太够?我的提取方法也就是原始文献里的冰域研磨,高盐低ph.提取叶绿体,sds37℃裂解,无水乙醇沉淀一晚上,无菌水溶解。
重复了很多次,调整了很多次,可是跑胶结果都是不亮,隐约是有条带的,可是一开始都看不清楚,在软件上看的话由于设施老化了,调好需要很长时间,之后胶连那条蓝色都退了,也是本科独立的第一个实验,有很多不扎实的知识,还希望大家可以提点一下,问题可能出在哪里?

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵阿香

新虫 (初入文坛)

2楼2018-07-24 10:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柚子呀oo

新虫 (初入文坛)



同本科
要提叶绿体DNA
我现在做了几次实验,只是用紫外分光光度计进行了检测,还没有跑胶
但是也感觉曲线不对,啥都没提出来...

想问一下,用乙醇沉淀了DNA以后,如何清洗晾干呢?  也不能用烘箱,但是我用75%的乙醇清洗了DNA(估计也没提出来)后,晾一个小时它也不干呐!
3楼2018-07-24 14:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

macgray11

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

4楼2018-07-24 16:13:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mengrui1

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 柚子呀oo at 2018-07-24 14:05:48


同本科
要提叶绿体DNA
我现在做了几次实验,只是用紫外分光光度计进行了检测,还没有跑胶
但是也感觉曲线不对,啥都没提出来...

想问一下,用乙醇沉淀了DNA以后,如何清洗晾干呢 ...

放在通风的地方,比如通风橱之类的地方
5楼2018-07-27 15:33:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

皮皮加油吧

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

6楼2018-07-27 18:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柚子呀oo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 皮皮加油吧 at 2018-07-27 18:25:24
小心吸出上清液,把管子放通风橱,一般一个小时就可以了。
...

嗯嗯好的,谢谢!
7楼2018-07-30 13:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

提取小仙

新虫 (初入文坛)

先排查问题吧,电泳时,做一个阳性对照,比如:加一个D2000的maker。看看是不是胶或者燃料的问题。

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-07-30 22:15:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 赵阿香 的主题更新
信息提示
请填处理意见