应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 扩增基因回收问题
51/1返回列表
查看: 285  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)

[交流] 扩增基因回收问题

我用的是高保真酶扩增的，扩完后用琼脂糖胶回收，点2 微升很亮，然后再加A尾，每样品4管，每管10微升的体系，72°c 30分钟后，用试剂盒回收，点2 微升没任何条带，只有Marker，然后再点5微升，一样没发现条带。这是怎么回事呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2009-03-31 09:09:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱静华

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢！ 3-31 14:36
muchong5577(金币+2,VIP+0):再次谢了 3-31 23:18
加A之后直接连接就可以了，为什么还要回收呢？我也是和楼主做法一样的，但是加A后我没有回收检验，直接做了接下来的连接转化，挑到了转化子
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-03-31 10:33:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

biogate21

铁虫 (正式写手)
★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢！ 3-31 14:36
柱子回收的效率太低，可以试试溶液回收，还可一实行忙连
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-03-31 09:27:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢！ 3-31 14:36
现在TA克隆已经很少有人用了
我倒是建议用双酶切克隆
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-03-31 11:44:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzm7806

我做的时候是扩增完直接加A尾，然后跑电泳，回收一次。连接T载体，也挑到阳性转化了。
赞一下 回复此楼
6楼2009-03-31 15:35:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研复试调剂，过国家线的同学都可报名 +4 黑！在干嘛 2026-02-28 5/250 2026-03-02 16:48 by chock1337
[考研] 理学，工学，农学调剂，少走弯路，这里欢迎您！ +3 likeihood 2026-03-02 5/250 2026-03-02 16:37 by ZRH_878
[考研] 接收调剂 +4 津萌津萌 2026-03-02 7/350 2026-03-02 16:37 by 津萌津萌
[考研] 清华大学 材料与化工 353分求调剂 +3 awaystay 2026-03-02 4/200 2026-03-02 16:35 by chuocheng
[考研] 材料与化工328求调剂 +3 。，。，。，。i 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:09 by houyaoxu
[考研] 275求调剂 +4 明远求学 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:45 by 无际的草原
[考研] 292求调剂 +7 yhk_819 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:43 by 无际的草原
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 材料复试调剂 +4 学材料的点 2026-03-01 5/250 2026-03-02 08:26 by houyaoxu
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭