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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 关于湿法装硅胶柱
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damuzhi818

木虫 (正式写手)

[交流] 关于湿法装硅胶柱

刚刚开始做天然产物的分离。一样品约30mg，用硅胶柱层析，湿装，二氯甲烷-甲醇搅拌硅胶上柱，再添加约3个柱体积的二氯甲烷-甲醇（也是上样后的淋洗液），采用鱼泵压实柱子，径高约1.5-20cm，可是跑完柱子后，发现硅胶一侧有塌陷，分离的效果也一般。请问湿装时怎样操作能防止柱子塌陷？另外采用多大的流速较合理，既能有较好的分离效果，又能节省时间？目前的我跑柱子流速一般为2-3s一滴.硅胶柱层析如何操作才能达到目标化合物比较好的分离效果？以减少走柱的个数，样品的丢失。由于接触不久，望各位多多指教。
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1楼 2009-03-30 21:08:51
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寒热虚实

金虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢，欢迎常来药学版~ 3-31 15:05
装柱子时一定要注意，将硅胶和二氯甲烷-甲醇搅拌，先加少量的“硅胶和二氯甲烷-甲醇”混合物，等其沉淀一下，再加入其它部分，（在加入的时候记得打开下部的阀门），一定要让前面加入的部分沉淀好后才能加入剩余的，负责柱子会装不好，要重新装的，
置于如何达到好的分离效果要自己摸索了，可以查查文献。
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一切有为法，如梦幻泡影，如露亦如电，应作如是观
2楼2009-03-31 09:44:39
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pal2004

木虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励~ 3-31 15:06
一定要让前面加入的部分沉淀好后才能加入剩余的，负责柱子会装不好
————————————————————————————————————
这句话我持保留意见，装柱前为了赶气泡要先往柱子里加入一定量溶硅胶的溶剂，
但是如果硅胶也要先沉淀一部分再加入剩下的，很容易在硅胶内部形成分界面，这样装的柱子不均匀，影响分离效果的。
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3楼2009-03-31 14:37:19
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hantianjiao

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论！ 3-31 23:34
同意2楼，硅胶应当一起加进去，今天我的柱子就是分段加硅胶，结果像竹子一样分节了，经验就是把硅胶活在初始流动相里，流动相可多加些，像打鸡蛋一样，搅至没有气泡，不再放热，在柱子中加入一定流动相，打开阀门，将硅胶缓慢的一起倒入柱中，随着硅胶在柱中的自然沉降，气泡就自然上升，装好后用加压装置压实。
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4楼2009-03-31 19:26:15
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damuzhi818

木虫 (正式写手)
感觉湿法装柱分离效果好些
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5楼2009-04-02 21:22:09
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放羊的小星星

木虫 (小有名气)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 4-3 16:06
补充一点，装好柱子后可以用两吸耳球敲敲柱子，让柱子尽量装实一些，柱子装的一定要均匀，以免短路现象
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6楼2009-04-03 11:30:15
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baboo

铜虫 (正式写手)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 4-3 16:06
二氯甲烷沸点太低了。很容易裂柱，选择二氯甲烷和甲醇，毒，注意防护。
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7楼2009-04-03 13:20:44
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