应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 【求助】电镜观察细胞，处理方法？
101/1返回列表
查看: 1336  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

ambitionxx

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】电镜观察细胞，处理方法？

我在二氧化钛上繁殖了成骨细胞，已经固定好了，PBS也洗了几次，现在想观察细胞的生长与繁殖情况。能不能，用去离子水漂洗几次后，自然风干（大约8小时）后喷金进行电镜观察。
     我看后多文章说要用梯度脱水后能观察，脱水的目的是什么？而且还要梯度脱水？然后临界干燥的目的又是什么？因为怕脱水后，细胞不饱满了，所照的图片不漂亮。请各位大虾多多指点。

[ Last edited by yusen_1982 on 2009-3-28 at 21:02 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科研资源

» 猜你喜欢
1楼 2009-03-28 19:53:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是我2082

木虫 (职业作家)
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论 5-29 09:46
在细胞生物学的徒手切片实验中，脱水的目的是除去组织中的水分，便于透明、浸蜡、包埋等步骤
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2009-03-29 13:11:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pliu6682

木虫 (正式写手)
★ ★
liubin(金币+1,VIP+0):欢迎交流！ 3-29 14:01
ambitionxx(金币+1,VIP+0): 4-15 19:06
在细胞生物学的徒手切片实验中，脱水的目的是除去组织中的水分，便于透明、浸蜡、包埋等步骤

楼主做的成骨细胞，不必这么麻烦去做。
赞一下(6人) 回复此楼
3楼2009-03-29 13:17:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ambitionxx

铜虫 (初入文坛)
薰衣草儿(金币+0,VIP+0):欢迎讨论，生物材料版期待您更多的参与~ 6-11 12:16
我做的是电镜观察，喷金等处理，和你说的不一样
引用回帖:
Originally posted by 我是我2082 at 2009-3-29 13:11:
在细胞生物学的徒手切片实验中，脱水的目的是除去组织中的水分，便于透明、浸蜡、包埋等步骤

赞一下(10人) 回复此楼
4楼2009-03-29 15:50:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ambitionxx

铜虫 (初入文坛)
薰衣草儿(金币+0,VIP+0):欢迎讨论，生物材料版期待您更多的参与~ 6-11 12:16
你有什么好的方法，我就进行SEM观察
引用回帖:
Originally posted by pliu6682 at 2009-3-29 13:17:
在细胞生物学的徒手切片实验中，脱水的目的是除去组织中的水分，便于透明、浸蜡、包埋等步骤

楼主做的成骨细胞，不必这么麻烦去做。

赞一下(10人) 回复此楼
5楼2009-03-29 15:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouqin8091

铜虫 (初入文坛)

电镜观察细胞处理各步骤详细分析与说明

★ ★ ★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎应助 3-30 10:37
ambitionxx(金币+2,VIP+0):很明白，谢谢！ 3-31 12:26
SEM（细胞粘附）实验方法：
1．细胞2*104/ml接种到材料上；
2．4,7,（3,5）天取样；
3．吸弃原有培养基；
4．加入1mLPBS培养基吹洗材料* 3次；
------------这步的目的是洗去细胞及材料表面杂质

5．吸弃PBS加入2.5-3.0% 戊二醛（固定2.5－3h）；
-------这步的目的是将细胞内的细胞骨架，细胞器，蛋白质固定

6．吸弃戊二醛,30%,50%,75%,80%,95%,100%(两次)梯度乙醇脱水（15min/次）；
---------梯度脱水是在损伤最小的情况下将细胞内的水去掉，用酒精代替，使细胞内原本是水的地方充填酒精，保持细胞原有形貌

7．在玻璃瓶中乙酸异戊酯替换（大于30min）；
-----------用乙酸异戊酯替换细胞内的酒精，是细胞内完全充填乙酸异戊酯，保持细胞原有形貌

8．临界点干燥后送扫描电镜观察。

--------出去可能存在的水分，以便上电镜，此时的细胞完全由乙酸异戊酯充填，保持原有形貌

SEM试验注意事项：
1.戊二醛现配现用；
2.用乙酸异戊酯替换时必须使用玻璃瓶；
自然风干是绝对不允许的，风干细胞内的细胞器等会坍塌，
赞一下(13人) 回复此楼
6楼2009-03-30 09:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mylllyn
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+0,VIP+0):欢迎讨论，生物材料版期待您更多的参与~ 6-11 12:16
引用回帖:
Originally posted by zouqin8091 at 2009-3-30 09:16:
SEM（细胞粘附）实验方法：
1．细胞2*104/ml接种到材料上；
2．4,7,（3,5）天取样；
3．吸弃原有培养基；
4．加入1mLPBS培养基吹洗材料* 3次；
------------这步的目的是洗去细胞及材料表面杂质

5．吸弃P ...

强！
7楼2009-05-28 14:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

milk5852

禁虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+0,VIP+0):欢迎讨论，生物材料版期待您更多的参与~ 6-11 12:16
本帖内容被屏蔽
8楼2009-05-28 18:13:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biofilm

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论 5-29 09:46
如果是普通扫描电镜的话，要在真空条件下观察，含有溶剂能行？或者在抽真空过程中可能会导致细胞破裂吧？不过用环境扫描电镜就不用脱水了！
赞一下(11人) 回复此楼
9楼2009-05-28 21:09:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

travelerchem

至尊木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+0,VIP+0):欢迎讨论，生物材料版期待您更多的参与~ 6-11 12:16
二氧化碳临界点干燥怎么实现？
赞一下(11人) 回复此楼
10楼2009-05-28 21:16:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ambitionxx 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 070300，一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭