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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 电泳
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hjp0805754wz

新虫 (小有名气)

[求助] 电泳 已有2人参与

酶切后跑胶，片段大概是9Kb,跑了40分钟没有跑出胶孔是什么原因？

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1楼 2018-06-23 22:23:21
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18115179716

金虫 (正式写手)
Maker怎么样？

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2楼2018-06-24 00:00:31
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walt亓鑫

新虫 (初入文坛)
你电压大概多大

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3楼2018-06-24 02:15:31
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汀语言

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-06-26 23:36:09
放个图，是只有这一个没跑出来，还是都没跑出来
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4楼2018-06-26 16:27:42
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hjp0805754wz

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18115179716 at 2018-06-24 00:00:31
Maker怎么样？

mark正常

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5楼2018-06-30 12:25:48
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hjp0805754wz

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by walt亓鑫 at 2018-06-24 02:15:31
你电压大概多大

200Vmark正常

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6楼2018-06-30 12:26:09
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hjp0805754wz

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hjp0805754wz at 2018-06-30 12:25:48
mark正常
...

还有一个问题，做的转化，挑了20个斑，然后进行菌液PCR P不出来条带，但是能在抗性条件下长，是什么原因呢(质粒检测过，没有问题）

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7楼2018-06-30 12:28:22
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petty04

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
drwhoknowss: 金币+3, 鼓励交流 2018-07-02 01:33:16
会不会你的蛋白加多了，蛋白堵孔了？酶切后可以做个高温变性蛋白，再跑胶试试；或者做个phenol-chloroform extraction去除一下蛋白再跑胶。

菌液PCR没有目的条带，但是能生长，这个原因多了，最可能的是插入了一个无用的PCR片段。
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8楼2018-06-30 15:09:37
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hjp0805754wz

新虫 (小有名气)
谢谢啦

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9楼2018-07-01 15:11:49
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