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sunsun923

禁虫 (初入文坛)

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sunsun923

禁虫 (初入文坛)

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4楼2018-06-05 11:12:11
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547star

木虫 (著名写手)

网络看到过有装柱视频,好像是GE提供的。你可以找找看。
为什么
2楼2018-06-05 10:21:25
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chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)

3楼2018-06-05 10:25:55
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
a.水洗
用5-10CV纯化水以0.5ml/min(HT 1ml)或2.0ml/min(HT 5ml)清洗介质。
备注:此步骤用于去除介质中20%乙醇。
b.平衡
用5-10CV平衡液以0.5ml/min(HT 1ml)或2.0ml/min(HT 5ml)平衡介质,直至基线平稳后调零。
备注:此步骤用于平衡介质,保证介质中的溶液的组分和pH与样本一致。
c.上样
上样前务必要确认样本溶液的pH在6.5-8.0范围内,再经过离心、过滤(0.45um)后以0.2ml/min(1ml)或1.0ml/min(5ml)进行上样,上样完成后用平衡液进清洗直至基线为零。
备注:蛋白的结合能力随着裂解物类型、目标蛋白性质、流速、温度、pH变化而变化,低流速常常能增加样本的结合效率。
d.洗脱
用5-10CV洗脱液以0.5ml/min(1ml)或2.0ml/min(5ml)进行洗脱,并收集洗脱液。
备注:低流速常常能增加洗脱液中目标蛋白的浓度。
e.水洗
用5-10CV纯化水以0.5ml/min(1ml)或2.0ml/min(5ml)清洗介质。
备注:此步骤用于去除介质中洗脱液。
f.保存
用5-10CV 20%乙醇以0.5ml/min(1ml)或2.0ml/min(5ml)清洗介质后保存。
备注:20%乙醇可以防止微生物的生长,20%乙醇保存的介质可以在4-30℃(4-8℃更佳)保存。

g.溶液配制
平衡液:0.14M NaCl、0.0027M KCl、0.01M Na2HPO4、0.0018M KH2PO4,调节pH 7.3,室温保存。
备注:平衡液配制完成后务必确保pH为7.3,当样本所在溶液的pH<6.5或pH>8.0时,样本与介质作用较弱甚至是无效的。
洗脱液:0.05M Tris-HCl、0.01M GSH,调节pH 8.0,4℃保存。
备注:洗脱液要求现配现用;也可以先配制0.05M Tris-HCl,pH 8.0在4℃保存,使用前再加入GSH并调整pH为8.0(加入GSH后,pH会降低)。
5楼2018-06-06 16:38:37
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