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小biubiu

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物种子 已有3人参与

我想做无菌水培，现在种子在MS培养基发芽，发芽甚至没发芽种子就发霉了，应该是霉菌。这达不到实验目的啊。种子是用乙醇和次氯酸钠做过消毒处理的，每步都是无菌操作，各位可以指导一下吗

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1楼 2018-06-04 23:24:40
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YLeg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没消毒好喽，延长消毒时间或者换消毒剂，乙醇加升汞不错。还有可能是由于表面张力，消毒剂没和种子接触充分，可以加一些表面活性剂比如吐温啥的

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2楼2018-06-05 08:45:27
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summerdayl

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
消毒的时间不够。我的种子是油菜，我看文献上都是乙醇消毒2min，然后次氯酸消毒10min，我这样做，实际上每一次都会长菌。后来我加长了消毒时间，乙醇消毒2min, 然后把种子放在一个容器里，倒次氯酸，在摇床上摇2小时左右，当然摇太久了也不行，摇太久了种子发芽被抑制了，发芽率很低，而且时间很长。
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3楼2018-06-06 11:34:37
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小biubiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by summerdayl at 2018-06-06 11:34:37
消毒的时间不够。我的种子是油菜，我看文献上都是乙醇消毒2min，然后次氯酸消毒10min，我这样做，实际上每一次都会长菌。后来我加长了消毒时间，乙醇消毒2min, 然后把种子放在一个容器里，倒次氯酸，在摇床上摇2小时 ...

油菜种子大吗，和小麦比起来

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4楼2018-07-04 12:59:58
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小biubiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by summerdayl at 2018-06-06 11:34:37
消毒的时间不够。我的种子是油菜，我看文献上都是乙醇消毒2min，然后次氯酸消毒10min，我这样做，实际上每一次都会长菌。后来我加长了消毒时间，乙醇消毒2min, 然后把种子放在一个容器里，倒次氯酸，在摇床上摇2小时 ...

我第二步用的次氯酸钠，你用次氯酸消毒过段时间消毒液会变黄色吗

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5楼2018-07-04 13:02:32
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小biubiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by YLeg at 2018-06-05 08:45:27
没消毒好喽，延长消毒时间或者换消毒剂，乙醇加升汞不错。还有可能是由于表面张力，消毒剂没和种子接触充分，可以加一些表面活性剂比如吐温啥的

谢谢

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6楼2018-07-04 13:02:59
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跳过圣母院

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以延长消毒时间，并且每个操作步骤更加仔细，我做的时候每一个器具都要经高温灭菌在进行试验，培养的地方也尽量保持干净卫生。
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7楼2018-09-06 21:10:11
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