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证明tf-8蛋白特异性识别并结合rod基因启动子区的tgtctc序列试验的设计
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类似的： 二、试验步骤 1 定点突变ROD基因启动子区的TGTCTC序列 首先设计两条引物，使引物覆盖ROD基因启动子区的突变位点TGTCTC，将该序列突变为其他碱基；以ROD基因为模板进行PCR扩增。PCR扩增后得到的片段与模板片段之间只在TGTCTC处有差异。 PCR得到的产物为一个缺刻质粒，用该缺刻质粒转化大肠杆菌，大肠杆菌会补齐缺口，并获得突变基因。可以通过测序的方法判断是否完成突变；也可在其未突变前与一个报告基因连接，PCR突变后，如果报告基因表达，则证明突变失败，反之，报告基因不表达，则证明突变成功。 2 进行EMSA试验 制备用32P标记过的标记探针：Labeled probe；无标记的核酸探针：Non-labeled probe；用32P标记过的突变探针：Labeled mut-probe；目标蛋白：Nucleoprotein；目标蛋白抗体：TF-8 antibody。 将以上样品及对照处理后，进行凝胶电泳实验，电泳结束后进行放射自显影，并对结果进行分析（本试验为单因素试验，样品浓度应保持一致）。 三、结 发自小木虫Android客户端 |
4楼2018-06-04 23:58:50
5楼2022-06-07 12:08:10
6楼2022-06-07 12:15:05
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