24小时热门版块排行榜    

查看: 1438  |  回复: 25
当前主题已经存档。

沙谷幽兰

木虫 (小有名气)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论~ 3-26 15:17
我碰到过和你一样的问题,我整整浪费了8个月时间,始终想不出问题处在哪了,最后一次偶然的机会我换了另一家公司的Taq酶,问题就解决了。所以我建议你换一下酶,酶的影响很大的
21楼2009-03-26 15:02:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞侠8683

新虫 (小有名气)

原因很多的
22楼2009-03-27 09:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjg_1979

木虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢,欢迎常来生物版~ 3-30 16:07
首先你得交待你的目的条带大小是多少,从你的图来看是你引物有问题,其次是你退火温度,由于你说的不清,所以究其原因还不能做肯定回答,给你的建议是:1,改变退火温度,降低模板浓度.2,若没有效果,请你重新设计引物.我想这样可以得到满意的效果,祝你成功!
23楼2009-03-27 11:12:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米见方ggsddu

金虫 (小有名气)

only屋里哇啦

模板纯度不够,引物特异性不强
如果要二次,第一次产物纯化会好些吧
低调潜行
24楼2009-03-28 23:32:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sarah_Shy

木虫 (小有名气)

换酶吧,我和你遇过一样的问题,换了别家公司的酶立马就好了
25楼2009-03-30 15:53:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恒星年

银虫 (正式写手)

你第一次PCR产物的条带就不是很好,已经有非特异性性扩增了,可能是退火温度不够,酶加多了,模板多了。第二次PCR成那个样子,可能还是那些原因,模板一定要进行稀释,稀释的倍数不够可能会出现这种问题。降低酶的用量和模板浓度,提高退火温度。
26楼2009-03-30 16:29:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hharl 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见