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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 再追加20个金币，求高人帮我解析一下电泳图
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沙谷幽兰

木虫 (小有名气)
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论~ 3-26 15:17
我碰到过和你一样的问题，我整整浪费了8个月时间，始终想不出问题处在哪了，最后一次偶然的机会我换了另一家公司的Taq酶，问题就解决了。所以我建议你换一下酶，酶的影响很大的
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21楼2009-03-26 15:02:52
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飞侠8683

新虫 (小有名气)
原因很多的
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22楼2009-03-27 09:53:11
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wjg_1979

木虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢，欢迎常来生物版~ 3-30 16:07
首先你得交待你的目的条带大小是多少，从你的图来看是你引物有问题，其次是你退火温度，由于你说的不清，所以究其原因还不能做肯定回答，给你的建议是：１，改变退火温度，降低模板浓度．２，若没有效果，请你重新设计引物．我想这样可以得到满意的效果，祝你成功！
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23楼2009-03-27 11:12:47
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米见方ggsddu

金虫 (小有名气)

only屋里哇啦
模板纯度不够，引物特异性不强
如果要二次，第一次产物纯化会好些吧
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低调潜行
24楼2009-03-28 23:32:40
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Sarah_Shy

木虫 (小有名气)
换酶吧，我和你遇过一样的问题，换了别家公司的酶立马就好了
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25楼2009-03-30 15:53:16
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恒星年

银虫 (正式写手)
你第一次PCR产物的条带就不是很好，已经有非特异性性扩增了，可能是退火温度不够，酶加多了，模板多了。第二次PCR成那个样子，可能还是那些原因，模板一定要进行稀释，稀释的倍数不够可能会出现这种问题。降低酶的用量和模板浓度，提高退火温度。
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26楼2009-03-30 16:29:10
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