应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 再追加20个金币，求高人帮我解析一下电泳图
261/3返回列表123下一页
查看: 1500  |  回复: 25
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

hharl

铜虫 (初入文坛)

[交流] 再追加20个金币，求高人帮我解析一下电泳图

图片中marker右面是二次PCR产物跑的琼脂糖，请问怎么能跑成这样 啊。什么原因啊。
marker右面是细菌16S rDNA的V3区片段，
但是跑成涂抹的是怎么回事？

图片1是一次PCR的产物跑的琼脂糖，可以看出条带。图片2中marker右面是二次PCR产物跑的琼脂糖，请问怎么能跑成这样啊,什么原因?环境体系什么的都相同，怎么二次P的时候就涂抹了呢？高人啊，求救啊~~~~

[ Last edited by hharl on 2009-3-24 at 16:14 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-03-23 21:23:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
hharl(金币+1,VIP+0):O(∩_∩)O谢谢 3-24 09:46
就是没有扩增出来，PCR的条件可以简要介绍一下吗？退火温度不合适、引物特异性不好、镁离子浓度不合适等等都有可能出现这种情况。
赞一下(3人) 回复此楼
金币是赌出来的
2楼2009-03-24 09:20:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangzi073

木虫 (著名写手)
★
hharl(金币+1,VIP+0):O(∩_∩)O谢谢 3-24 09:46
可能是忘记加什么成分了？
赞一下(3人) 回复此楼
做人要知足做事要知不足做学问要不知足
3楼2009-03-24 09:29:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★
hharl(金币+5,VIP+0):平时都能P出来的，都是按文献走的，不知道为什么这次不行，愁死我了！ 3-24 09:45
hharl(金币+1,VIP+0):shi yinwu yongcole 4-8 10:57
典型的二次扩增时，模板没有稀释，或者说稀释倍数不够
第二种情况是酶加太多了
还有就是退火温度太低
我建议你用热启动酶试试
赞一下(5人) 回复此楼
4楼2009-03-24 09:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Charlie1331

金虫 (正式写手)
★
hharl(金币+1,VIP+0):谢谢 3-24 15:55
是不是跑胶时的缓冲液里杂质太多了呢？建议换缓冲液。
赞一下(3人) 回复此楼
5楼2009-03-24 12:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

redfoliage

铜虫 (初入文坛)
★ ★
hharl(金币+2,VIP+0):我又重新做了一回，还那样。我晕死了 3-24 15:57
应该不是电泳的问题，Maker跑的很好啊，可能还是PCR的问题，如果以前相同条件能扩增出来的，会不会PCR体系有问题了，dNTP反复冻融？引物时间太久了？酶有问题了？建议换新的体系再做一次
赞一下(2人) 回复此楼
细节决定成败
6楼2009-03-24 12:45:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
★
hharl(金币+1,VIP+0):谢谢 3-24 15:58
你首先检查一下是否是模板降解。然后考虑是否模板不纯，可能含有抑制PCR酶的杂质。重新考虑提取方法
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2009-03-24 12:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

darming

铁虫 (初入文坛)
★
hharl(金币+1,VIP+0):谢谢 3-24 15:58
提高一下引物浓度
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2009-03-24 14:56:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★
hharl(金币+1,VIP+0):谢谢 3-24 15:59
出现smear，重新做PCR
赞一下(2人) 回复此楼
我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
9楼2009-03-24 15:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcy1121

木虫 (正式写手)
★
hharl(金币+1,VIP+0):谢谢 3-24 21:44
有可能是模板或者引物降解了，
或者PCR特异性不好
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-03-24 16:21:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hharl 的主题更新
261/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291 求调剂 +6 化工2026届毕业� 2026-03-21 7/350 2026-03-26 02:14 by BruceLiu320
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 287求调剂 +10 晨昏线与星海 2026-03-19 11/550 2026-03-25 10:35 by userper
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭