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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR产物问题
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huxuesong143

金虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物问题

我要鉴定一只菌，初步定为放线菌，提出来的基因组跑胶后显示大于12000bp，而用16S通用引物克隆出来的，产物不一，用TAKARA ex Taq酶只产物1500bp一条，而用上海生工的pfu taq 酶产物有很多条，1000bp，800bp，500以下还有拖尾现象，请各位帮忙解答一下啊，谢了先啊。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-4 at 20:53 ]
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1楼 2009-03-21 10:57:21
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elton_monkey

银虫 (初入文坛)
我们这都用ex taq扩增，产物大小要根据你通用引物的选择来看的吧。要是产物大小预计是1500bp的直接切胶回收测序就行了。
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9楼2009-04-01 21:45:55
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huxuesong143

金虫 (初入文坛)

附电泳条带图

各位，帮忙看看啊
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2楼2009-03-22 13:05:06
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
是不是Taq酶被污染了呀，你再查文献看看一般放线菌的16S有多大
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3楼2009-03-22 16:28:06
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huxuesong143

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 欣晴5832 at 2009-3-22 16:28:
是不是Taq酶被污染了呀，你再查文献看看一般放线菌的16S有多大

我买的是不同公司的酶,新的,应该不存在污染的问题啊
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4楼2009-03-25 22:05:44
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