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huxuesong143

金虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物问题

我要鉴定一只菌,初步定为放线菌,提出来的基因组跑胶后显示大于12000bp,而用16S通用引物克隆出来的,产物不一,用TAKARA ex Taq酶只产物1500bp一条,而用上海生工的pfu taq 酶产物有很多条,1000bp,800bp,500以下还有拖尾现象,请各位帮忙解答一下啊,谢了先啊。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-4 at 20:53 ]
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elton_monkey

银虫 (初入文坛)

我们这都用ex taq扩增,产物大小要根据你通用引物的选择来看的吧。要是产物大小预计是1500bp的直接切胶回收测序就行了。
9楼2009-04-01 21:45:55
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huxuesong143

金虫 (初入文坛)

附电泳条带图

各位,帮忙看看啊
2楼2009-03-22 13:05:06
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

是不是Taq酶被污染了呀,你再查文献看看一般放线菌的16S有多大
3楼2009-03-22 16:28:06
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huxuesong143

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 欣晴5832 at 2009-3-22 16:28:
是不是Taq酶被污染了呀,你再查文献看看一般放线菌的16S有多大

我买的是不同公司的酶,新的,应该不存在污染的问题啊
4楼2009-03-25 22:05:44
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