24小时热门版块排行榜    

查看: 2071  |  回复: 13

柠檬树123456

新虫 (初入文坛)


已领完
CHI,PAL酶活性
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫,下载小木虫客户端

PAL、CHI 酶活性的测定 取 0.5  g 果皮加入 5  ml 提取液  [0.05  mol·L-1 Na2HPO4/KH2PO4(p H  7.0),0.05  mol·L-1抗坏血酸,0.018  mol·L-1巯基乙醇],冰浴匀浆,4  oC 下 15  000  g离心 20 min,取上清液为粗酶液。
PAL: 取0.5m L酶粗提液,加入2.5m L的反应体系(包括硼酸缓冲液,p H 8.8;0.01M 苯丙氨酸)34℃水浴30min 后,加入三氟乙酸终止反应。12,000 rpm 离心5min,除去变性的蛋白质。反应生成的肉桂酸含量用290nm的吸光度值来表示。
CHI酶活性测定:取0.75 m L酶粗提液,加入2 m L混合反应液[50m mol·L-1的Tris-HCL(p H 7.4)、7.5 mg·L-1 BSA,50m mol·L-1的Na HSO3],然后加入50μL 1 mg·m L-1的查尔酮溶液。34℃水浴30min 后,在381nm处测定吸光值,用吸光值的变化表示CHI酶的活性,每小时光密度变化0.001所需的酶量为一个单位U。
大家查尔酮溶液用什么配置呢?
以沸水浴灭活酶活性为对照,按这个方案做实验,预实验觉得没问题,但正式做的结果是对照的吸光度比实验组的吸光度还高,而且吸光度都异常,在0.6-0.8左右,求解,实验卡在这了,求大神!急急急,在线等

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬树123456

新虫 (初入文坛)


大家,不要领了金币不说话啊

发自小木虫Android客户端
7楼2018-04-23 08:43:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静怡止远

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
CHI和PAL之前我用的试剂盒测定,说明书里有测定方法,需要的话可以给你参考
11楼2018-04-25 09:45:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬树123456

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
11楼: Originally posted by 静怡止远 at 2018-04-25 09:45:54
CHI和PAL之前我用的试剂盒测定,说明书里有测定方法,需要的话可以给你参考

试剂盒也用过,太贵了,不用了。

发自小木虫Android客户端
12楼2018-04-25 11:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静怡止远

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
沸水浴处理对照组容易出现OD值异常,之前测PG酶时也有这样的情况,我的处理方法是将提取上清稀释10倍后测定,结果就好了,你也可以尝试将沸水浴后的体系离心一下,排除产生杂质物质的影响。
13楼2018-04-25 13:05:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

死神的右手

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我用分光计测过几次各种浓度啊乱七八糟 个人一直感觉这个东西不稳定,可能还是操作上有瑕疵吧,肯定是反应体系里有了不该有的东西
14楼2018-08-01 09:32:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
pandongzi2楼
2018-04-23 08:30   回复  
柠檬树123456(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
ygsu3楼
2018-04-23 08:37   回复  
柠檬树123456(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
2018-04-23 08:40   回复  
柠檬树123456(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
2018-04-23 08:40   回复  
柠檬树123456(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
若你⑤6楼
2018-04-23 08:40   回复  
柠檬树123456(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫IOS客户端
2018-04-23 08:44   回复  
柠檬树123456(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
wanwlzwj9楼
2018-04-23 08:44   回复  
柠檬树123456(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
2018-04-23 08:45   回复  
柠檬树123456(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 柠檬树123456 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见