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小小艾999

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA重组测序不成功

目的基因载体质粒PCR之后,跑电泳见10000左右条带,单酶切后,跑电泳见8000左右条带,然后自连,转DH5阿尔法细胞,挑单克隆,摇菌,送测序,公司没测出来?!     自己又把那天摇的菌提了个质粒,跑电泳,只有2000左右条带!!    实验小白,求助各位师兄姐,这是怎么回事 ?   我要的目的条带应该大约在8000左右。

@biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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无心云朵

银虫 (初入文坛)

涂板后,你先挑单克隆菌体,做个PCR鉴定,你自己找筛选一遍哈,一般转化实验都会有假阳性,最后你才将PCR菌落鉴定阳性菌去测序,这样可靠性更大~

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2楼2018-04-18 08:28:40
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小小艾999

新虫 (初入文坛)

3楼2018-04-18 09:22:20
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小小艾999

新虫 (初入文坛)

对照组没有长  所以就直接送测序了  但是我没有验证菌液     谢谢

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4楼2018-04-18 09:24:15
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