| 查看: 827 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助－sfiI 限制性内切酶的特性
|
|||
|
我要构建一些载体，载体上特有的酶切位点是sfiI ，在使用的过程中发现如果是过夜酶切的话，好像片断会被切坏，导致电泳后目的片段的大小不对，如果时间短的话，酶切的效果不是很好，电泳检测到的目的片段量很少。 请教用过这个酶的朋友，使用sfiI最佳的酶切时间是多少？ 在使用的过程中还有其他什么地方需要注意的？ 谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
321求调剂
已经有4人回复
-
总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂
已经有4人回复
-
085600材料与化工306
已经有5人回复
-
265求调剂
已经有15人回复
-
化学工程085602 305分求调剂
已经有16人回复
-
考研调剂
已经有8人回复
-
289求调剂
已经有17人回复
-
一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂
已经有9人回复
-
一志愿华理，数一英一285求A区调剂
已经有6人回复
-
一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂
已经有7人回复
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
|
识别位点 在不同反应缓冲液中的活性 NEBuffer 1: 0% NEBuffer 2: 100% NEBuffer 3: 10% NEBuffer 4: 100% 酶的特性 浓度：20,000 units/ml(通过Adenovirus-2 DNA鉴定)。 反应缓冲液：(随酶提供) NEBuffer 2 + BSA。 反应温度：50°C温育。 热失活：无。 概述 来源：重组E. coli 菌株，包含有从Streptomyces fimbriatus (ATCC 15051) 克隆的SfiI基因。 连接和再切：经过SfiI 10倍过量消化, 超过95%的DNA片段能够被连接和再切。 贮存条件：贮存于-20°C (含50%甘油)。 稀释兼容性：稀释液C。 注意事项 1. 对dcm和哺乳动物CpG甲基化敏感。 2. SfiI的切割需要两个拷贝数的识别位点。 3. 37°C温育只有10%的活性。 买NEB的，根据质粒浓度调整酶切时间，一般一个小时足矣 买takara的就只好一边哭去了…… |
5楼2009-03-19 23:20:40
Ella14
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 142.9
- 散金: 9
- 帖子: 227
- 在线: 17.4小时
- 虫号: 442710
- 注册: 2007-10-27
- 性别: MM
- 专业: 细胞衰老
2楼2009-03-19 19:22:58
3楼2009-03-19 19:26:41
4楼2009-03-19 22:10:06
