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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wangdandelia

木虫 (正式写手)

[交流] 求助PCR技术问题

我的PCR体系都不变,温度也没改变,可是为什么出来的结果在电泳的时候都是不一样的呢?有时候出现一点目的条带,有时候不出,而且很多时候都是很多非特异性条带,!怎么回事呢???

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-7 at 20:26 ]
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wangdandelia

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 欣晴5832 at 2009-3-21 08:55:
PCR体系中各成分在加之前都轻轻混匀一下,那些产品都没什么问题吧?

我也在想呢,可能是产品出了问题,还有自己的操作有问题!~
请问在PCR是先加水呢还是最后加呢?我之前都是先加水,而且最后加入模板,可能自己对这些操作顺序需要改进!~
10楼2009-03-21 21:50:21
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欣晴5832

金虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 3-21 18:42
你提高退火温度试一下,另外PCR体系中的各成分的量也需要优化调整
2楼2009-03-20 09:34:20
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jiwu20

铜虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 3-21 18:42
我的PCR体系都不变,温度也没改变,可是为什么出来的结果在电泳的时候都是不一样的呢?模板的问题。
有时候出现一点目的条带,有时候不出,而且很多时候都是很多非特异性条带,!怎么回事呢???
还是模板的问题,
做实验一定要设阳性及阴性对照。iimportant
4楼2009-03-20 11:27:38
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wangdandelia

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by jiwu20 at 2009-3-20 11:27:
我的PCR体系都不变,温度也没改变,可是为什么出来的结果在电泳的时候都是不一样的呢?模板的问题。
有时候出现一点目的条带,有时候不出,而且很多时候都是很多非特异性条带,!怎么回事呢???
还是模板的问 ...

请问是模板哪里出了问题呢?是DNA降解了,还是被污染了呢?
5楼2009-03-20 14:29:23
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