24小时热门版块排行榜    

查看: 757  |  回复: 15
当前主题已经存档。

wangdandelia

木虫 (正式写手)

[交流] 求助PCR技术问题

我的PCR体系都不变,温度也没改变,可是为什么出来的结果在电泳的时候都是不一样的呢?有时候出现一点目的条带,有时候不出,而且很多时候都是很多非特异性条带,!怎么回事呢???

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-7 at 20:26 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣晴5832

金虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 3-21 18:42
你提高退火温度试一下,另外PCR体系中的各成分的量也需要优化调整
2楼2009-03-20 09:34:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xipha

木虫 (正式写手)

可能没混匀
3楼2009-03-20 10:45:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiwu20

铜虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 3-21 18:42
我的PCR体系都不变,温度也没改变,可是为什么出来的结果在电泳的时候都是不一样的呢?模板的问题。
有时候出现一点目的条带,有时候不出,而且很多时候都是很多非特异性条带,!怎么回事呢???
还是模板的问题,
做实验一定要设阳性及阴性对照。iimportant
4楼2009-03-20 11:27:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangdandelia

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by jiwu20 at 2009-3-20 11:27:
我的PCR体系都不变,温度也没改变,可是为什么出来的结果在电泳的时候都是不一样的呢?模板的问题。
有时候出现一点目的条带,有时候不出,而且很多时候都是很多非特异性条带,!怎么回事呢???
还是模板的问 ...

请问是模板哪里出了问题呢?是DNA降解了,还是被污染了呢?
5楼2009-03-20 14:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

做温度的梯度看看
6楼2009-03-20 20:14:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣晴5832

金虫 (小有名气)

PCR体系中各成分在加之前都轻轻混匀一下,那些产品都没什么问题吧?
7楼2009-03-21 08:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

操作的问题
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
8楼2009-03-21 13:56:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linkfuture


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 3-21 18:42
提高退火温度,模板可能有杂质
9楼2009-03-21 17:30:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangdandelia

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 欣晴5832 at 2009-3-21 08:55:
PCR体系中各成分在加之前都轻轻混匀一下,那些产品都没什么问题吧?

我也在想呢,可能是产品出了问题,还有自己的操作有问题!~
请问在PCR是先加水呢还是最后加呢?我之前都是先加水,而且最后加入模板,可能自己对这些操作顺序需要改进!~
10楼2009-03-21 21:50:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangdandelia 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见