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蛋白被凝血酶酶切效率低，好苦恼 已有2人参与
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前几次切的还不错，最近总是切不好，也不知道什么原因，压力好大 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2018-09-06 12:52:31
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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thrombin买GE的比较好。如果你说前几次切的比较好，没有问题，最近切的有问题，那么可以考虑两方面，一方面是你的酶活性，是否因为保存条件等导致下降，可以加一个别人验证过的、能切开的蛋白作为对照，验证你的酶活。另一方面是你的蛋白纯化的是否有问题，是与前几次不同批次的蛋白吗？建议检查一下蛋白的质量，另外排除其中可能混有的蛋白酶抑制剂。如果从一开始就切的不好，但是酶活验证没有问题，则可以考虑加一些additive，具体可以参考各公司说明书，有很多大公司的thrombin说明书给出了相当多的酶切效果改善方法，可以适当选用尝试。祝好 发自小木虫Android客户端 |
3楼2018-09-07 18:15:24
4楼2018-09-07 18:19:36