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求助！求助！求助！T载体转化问题
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紧急求助啊！快崩溃了。请大家帮帮忙！ 我最近在做大肠杆菌转化实验，基本过程是： 载体：pMD19 T载体 外源DNA为纯化的PCR产物（使用的Tap酶可在3·端加一个A） 宿主DH5a， 制备感受态DH5a；载体与外源DNA连接；转化DH5a，涂含有氨苄青霉素的平板，培养过夜，随机挑选5单克隆，菌落PCR电泳检测含有外源DNA的克隆，我用外源DNA特异性引物或T载体的通用引物，结果全是阴性结果。我重复做了3次转化了，结果还是阴性，不知道是为什啊，郁闷啊！ |
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4楼2009-03-19 13:22:17
