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长大的小鱼93新虫 (小有名气)
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[求助]
使用镍柱纯化蛋白后，进行透析，蛋白全部沉淀，求问这是什么原因，请大神给一些建议
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| 使用镍柱对含有HIS标签的蛋白进行纯化，蛋白较大，十二聚体，720KD左右。使用镍柱洗脱时使用高浓度咪唑，所以对纯化出来的蛋白进行透析，透析缓冲液为pH6.0的磷酸缓冲液（磷酸二氢钠、磷酸氢二钠）六小时后发现蛋白全部沉淀。之前使用同样的缓冲液条件透析时，有时会沉淀有时不会，这种情况会和蛋白浓度有关吗？还是说我的蛋白是十二聚体，所以不稳定易沉淀？有没有出现过同样情况的？蛋白都沉淀了真是令人难过啊，实验也无法继续下去，求大神们给些建议，谢过！！！ |
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2楼2018-04-11 17:28:04
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-04-13 07:55:34
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3楼2018-04-11 18:36:41
yubeihong
铁杆木虫 (职业作家)
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4楼2018-04-12 19:10:28
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5楼2018-04-13 09:38:57