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shuichua95

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求大神!双酶切成功,但是连不到pET30a上 已有3人参与

求助各位大神!我们用Nde l 和Xho l双酶切,酶切成功,条带也亮。但是胶回收后DNA浓度不高,连接不到pET30a上,导入到TOP10后转化涂板,一个菌也不长 求大神指点

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dellxiong

金虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
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drwhoknowss: 金币+3, 鼓励交流 2018-04-05 03:18:44
这个载体及酶切位点 我经常用的!

片段酶切完后,取少量电泳验证一下。

另,转化克隆一个不长,可能是感受态细胞没有活性了。(实际上空载体也会长出单克隆的)
2楼2018-04-04 17:10:21
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
胶回收试剂盒效率不高,试试purimag的试剂盒

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3楼2018-05-09 00:39:33
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ZM93098

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不用胶回收,直接液回收,比如说索莱宝的1型核酸染料就不适合胶回收

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FUN
4楼2018-05-09 09:50:44
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