应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 200-400KD的蛋白做western
71/1返回列表
查看: 2487  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

吕葱葱同学

新虫 (初入文坛)

[交流] 200-400KD的蛋白做western 已有5人参与

最近用自己做的多抗检220KD和400KD的蛋白，总是检不出来带，内参没问题，求支招。

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
好好学习
1楼 2018-03-29 19:35:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在水壹方

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-03-29 23:49:27
蛋白分子量有点大

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2018-03-29 23:41:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
既然内参没问题。抗体问题，或表达问题。另外，400kd真的很大
赞一下(1人) 回复此楼
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
3楼2018-03-29 23:49:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanray110

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
说实话，这个蛋白的大小吓到我了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
人常在什么都可以自由自在的时候，却被这种随心所欲的自由蒙蔽，虚掷时光而毫无知觉！
4楼2018-03-31 10:47:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

掌控恶魔

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
400kd？你确定下你的蛋白胶能不能用于200-400的样品啊。或者你的体系是否适用啊

做不出结果的原因比较多，200-400kda，这个蛋白得多大啊。有可能蛋白不稳定，样品处理的时候导致发生了 降解？
也有可能目的蛋白的表达丰度不高，甚至没有表达蛋白，导致没有条带
抗体问题也有，抗体是用什么做抗原的？多肽还是蛋白？抗体的纯化方式，抗体的效价如何？
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2018-04-02 15:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻易不説

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
制胶的比例对么？400kd

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
新人报到，多多关照
6楼2018-04-02 18:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吕葱葱同学

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 掌控恶魔 at 2018-04-02 15:15:19
400kd？你确定下你的蛋白胶能不能用于200-400的样品啊。或者你的体系是否适用啊

做不出结果的原因比较多，200-400kda，这个蛋白得多大啊。有可能蛋白不稳定，样品处理的时候导致发生了 降解？
也有可能目的蛋白 ...

我是敲除了一个很大的基因，它表达的蛋白有220KD，另一个基因表达400KD，敲除之后要回补，回补与敲除株都要在蛋白水平去验证蛋白在或者不在，因为PCR验证只是在基因水平上。抗体用是截断表达的蛋白做的，50KD，蛋白水平辅助验证，我不是专业做蛋白的，所以需要交流和讨伦。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
好好学习
7楼2018-04-02 22:15:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 吕葱葱同学 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭