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200-400KD的蛋白做western
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吕葱葱同学
新虫
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性别:
MM
专业: 基因表达调控与表观遗传学
[交流]
200-400KD的蛋白做western
已有5人参与
最近用自己做的多抗检220KD和400KD的蛋白,总是检不出来带,内参没问题,求支招。
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好好学习
1楼
2018-03-29 19:35:43
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drwhoknowss
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注册: 2014-11-01
性别: GG
专业: 人类遗传学
管辖:
分子生物
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
既然内参没问题。抗体问题,或表达问题。另外,400kd真的很大
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
3楼
2018-03-29 23:49:18
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在水壹方
新虫
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专业: 生物化学
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流
2018-03-29 23:49:27
蛋白分子量有点大
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2楼
2018-03-29 23:41:49
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fanray110
木虫
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注册: 2013-03-13
性别: GG
专业: 昆虫学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
说实话,这个蛋白的大小吓到我了
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人常在什么都可以自由自在的时候,却被这种随心所欲的自由蒙蔽,虚掷时光而毫无知觉!
4楼
2018-03-31 10:47:27
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掌控恶魔
新虫
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注册: 2016-02-01
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
400kd?你确定下你的蛋白胶能不能用于200-400的样品啊。或者你的体系是否适用啊
做不出结果的原因比较多,200-400kda,这个蛋白得多大啊。有可能蛋白不稳定,样品处理的时候导致发生了 降解?
也有可能目的蛋白的表达丰度不高,甚至没有表达蛋白,导致没有条带
抗体问题也有,抗体是用什么做抗原的?多肽还是蛋白?抗体的纯化方式,抗体的效价如何?
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5楼
2018-04-02 15:15:19
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