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求助:关于淡水藻类CAT和SOD的测定
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我使用的是淡水藻--普通小球藻,提取酶的方法是将培养5天后的小球藻液离心收集(4000rpm/min),倒去上清液,然后将藻倒入预冷的研钵中用液氮研磨,加入2ml磷酸缓冲液,再高速离心20min,使用上清液进行CAT和SOD的酶活测试,使用的南京建成的试剂盒,但效果不好,CAT和SOD的吸光度变化很小。 1.离心收集后小球藻后,里面仍还有一定的水分,然后再去研磨,是不是这样研磨不充分,是不是一定要用干样研磨? 2.我用的是0.05mol/L的磷酸--氢氧化钠缓冲液,是不是要用其它的缓冲液? 3.液氮研磨时先加入一点液氮预冷,然后再加藻样和液氮研磨,可能是含有水分的缘故,都结冰,怎样才能使研磨充分? 4.是不是方法有问题? 请多多指教,谢谢 |
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