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zhumenjun

木虫 (正式写手)

[交流] 求助:关于淡水藻类CAT和SOD的测定

我使用的是淡水藻--普通小球藻,提取酶的方法是将培养5天后的小球藻液离心收集(4000rpm/min),倒去上清液,然后将藻倒入预冷的研钵中用液氮研磨,加入2ml磷酸缓冲液,再高速离心20min,使用上清液进行CAT和SOD的酶活测试,使用的南京建成的试剂盒,但效果不好,CAT和SOD的吸光度变化很小。
1.离心收集后小球藻后,里面仍还有一定的水分,然后再去研磨,是不是这样研磨不充分,是不是一定要用干样研磨?
2.我用的是0.05mol/L的磷酸--氢氧化钠缓冲液,是不是要用其它的缓冲液?
3.液氮研磨时先加入一点液氮预冷,然后再加藻样和液氮研磨,可能是含有水分的缘故,都结冰,怎样才能使研磨充分?
4.是不是方法有问题?
请多多指教,谢谢
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km_coffee

木虫 (初入文坛)


kongsun(金币+1,VIP+0):谢谢你的建议,欢迎常来环境版! 3-18 08:08
我以前做时是用玻璃纤维滤膜抽滤,基本抽干了,再加液氮研磨,效果还可以,建议试试,比离心来得快多了
2楼2009-03-18 04:20:57
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