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bbpiger

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC进样物质浓度相同,峰面积不同,而且差很多,峰越来越宽!已有5人参与

求助各位大神:

走HPLC出现以下问题:

1、进样的溶液中各物质(3个)浓度相同,但是峰面积随着出峰时间越来越低,尤其是第三个物质的峰面积更低。不仅如此,峰越来越宽!越来越矮!原因何在?

2、前几天做,和今天相同的条件相同的仪器,没有出现过倒峰,今天却出现了,是什么原因呢?


谢谢各位!
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bbpiger

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zpsune at 2018-03-28 14:14:28
第一种情况可能是你选的方法不适合后面物质的检测,最好换一个更好的方法。
第二种情况你还是都检查一遍吧,流动相配制有无问题,有无脱气,洗针液还有没有,还有各个泵怎么样,再就是看柱子怎么了,应该有好多种情 ...

首先非常感谢您的解答!
但是我还是有疑问:第一种情况您说的方法不合适,是指我各个条件选的不合适吗,比如波长、柱温、pH、流动相比例、流速等吗,有没有可能是定量环出现问题了呢?

可是如果是定量环有问题,另外两种物质的峰看着正常啊,


我发现第二种情况的时候,确实发现了水相的吸滤头上有些许小气泡,然后我就purge 脱气处理了,可是仍然不行,明天我先试试重新换流动相试试
11楼2018-03-29 20:41:20
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查看全部 17 个回答

SunflowerL

新虫 (小有名气)

这是正常情况吧,如果后面的峰不是那种接受不了的话

发自小木虫Android客户端
2楼2018-03-27 23:57:11
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moviehua

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
每种物质在特定波长的吸收值是一样的嘛?你需要看的是同种物质在每次出峰面积及出峰时间是否一样。
3楼2018-03-28 09:34:04
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姚首诚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
每个物质在相同波长下的响应值是不同的,所以峰面积不同是正常的。峰形一般出峰时间越晚,峰形就会越宽的。
4楼2018-03-28 10:46:30
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