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zhaoyue_82

铁虫 (小有名气)

[交流] 请帮我看看我提的RNA

我提的是一种药用植物金线莲的叶片,用的是TRIZOL法,总是降解,请各位高手指点一下

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:21 ]
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-3-16 17:41:
首先确定你跑的是否是变性胶,通常的agarose gel跑出来的条带很容易降解的,这也是一个原因

你好   我用变性胶电泳  使用goldview染液,直接加到未凝固的胶里,跑出来的结果是一半亮一半暗,可能把RNA的亮带盖住了,看不见,该如何解决?谢谢……你用的是什么染液,如何做的使之跑出条带?
7楼2009-03-16 18:41:15
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虫子739

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):积极交流奖 4-14 22:02
我提出来差不多也是这种效果。有经验的人总说要注意研磨时的液氮保护,可是还是达不到28S的亮度是18S的两倍。
我用的差不多质量的RNA做反转录后,内参的PCR结果是有的,但目的基因的条带没有。你要用它干什么?
2楼2009-03-16 16:26:31
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zhaoyue_82

铁虫 (小有名气)

多谢回复!
我是用来做差异基因的,打算做SSH,对RNA质量要求蛮高的,一个做过的师兄提出来的图特别漂亮,5S很淡,28S明显是18S的两倍,我就是提不出来
3楼2009-03-16 17:03:00
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zhaoyue_82

铁虫 (小有名气)

请问你提的时候有专门的RNA操作区吗?我们实验室条件差,只能在普通的试验台上提,用酒精擦擦就不错了。有人说还得在超净台里提。
4楼2009-03-16 17:04:34
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