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zhaoyue_82

铁虫 (小有名气)

[交流] 请帮我看看我提的RNA

我提的是一种药用植物金线莲的叶片,用的是TRIZOL法,总是降解,请各位高手指点一下

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:21 ]
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jasco

木虫 (正式写手)

鉴于你是提取植物叶片的rna,加液氮研磨成粉末后,加trizol继续研磨(trizol会冻住)到trizol成液态,然后按常规方法做。

电泳用普通tae电泳完全可以,不必强求变性胶
14楼2009-03-18 15:53:49
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虫子739

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):积极交流奖 4-14 22:02
我提出来差不多也是这种效果。有经验的人总说要注意研磨时的液氮保护,可是还是达不到28S的亮度是18S的两倍。
我用的差不多质量的RNA做反转录后,内参的PCR结果是有的,但目的基因的条带没有。你要用它干什么?
2楼2009-03-16 16:26:31
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zhaoyue_82

铁虫 (小有名气)

多谢回复!
我是用来做差异基因的,打算做SSH,对RNA质量要求蛮高的,一个做过的师兄提出来的图特别漂亮,5S很淡,28S明显是18S的两倍,我就是提不出来
3楼2009-03-16 17:03:00
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zhaoyue_82

铁虫 (小有名气)

请问你提的时候有专门的RNA操作区吗?我们实验室条件差,只能在普通的试验台上提,用酒精擦擦就不错了。有人说还得在超净台里提。
4楼2009-03-16 17:04:34
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