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基因克隆求助!!
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现在情况是我要克隆某基因cDNA序列,已知的是有该基因的cDS序列(3400bp)信息(师姐之前分段测序得出),我想克隆包括cds序列以及5’和3'非编码区的cDNA全长,以CDS序列为模板分段设计了两对引物,第一对引物的下游和第二对引物的上游互补,想用重组PCR方法扩出大部分cds序列(5'端和3'端各有50bp左右因不好设计引物,没在扩增范围内),我想问的是我这个思路对不对,接下来该怎么办?另外在NCBI上有预测的该基因的mRNA序列,之前也想用这个直接设计来着,怕有突变没敢这么设计。我接下来该怎么办?求解答!!! 发自小木虫Android客户端 |
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