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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR回收
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夏末至，转身

新虫 (小有名气)

[求助] PCR回收 已有4人参与

定点突变PCR扩增后切胶回收为什么回收不出来，刚开始以为是试剂盒的事，今天换了试剂盒结果回收后跑胶还是没有，这是为什么？

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1楼 2018-03-16 20:07:02
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1272356152

新虫 (正式写手)
不用回收

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夏末至，转身
2楼2018-03-16 20:55:34
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
PCR产物条带不够亮，浓度太低了吧？如果是这样，就多扩增几管一起做胶回收。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

夏末至，转身
。
3楼2018-03-17 04:55:41
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bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
回收没有，你确定PCR的时候有条带？有几种可能性，你可以重新PCR如果有带多做一些，然后一起回收，这是考虑回收浓度的问题，还有就是可能PCR就没有带，可以考虑重新设计引物
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夏末至，转身
生活活生生累死
4楼2018-03-17 09:02:02
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夏末至，转身

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by bio转录组 at 2018-03-17 09:02:02
回收没有，你确定PCR的时候有条带？有几种可能性，你可以重新PCR如果有带多做一些，然后一起回收，这是考虑回收浓度的问题，还有就是可能PCR就没有带，可以考虑重新设计引物

pcr后跑了胶，确定有条带，我也让其他人看了，我们猜测可能真的是浓度太低的问题

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5楼2018-03-17 22:41:54
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夏末至，转身

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2018-03-17 04:55:41
PCR产物条带不够亮，浓度太低了吧？如果是这样，就多扩增几管一起做胶回收。

嗯嗯，有可能是浓度低的问题，下次一起回收

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6楼2018-03-17 22:43:09
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夏末至，转身

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1272356152 at 2018-03-16 20:55:34
不用回收

不用回收？那怎么往下做嘞，回收了以后我还要连接导入大肠杆菌呢，必须回收嘞

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7楼2018-03-17 22:44:29
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1272356152

新虫 (正式写手)
私信我，我告诉你怎么做

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8楼2018-03-18 00:47:25
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ghst110

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不用回收，DPn I可直接消化，消化完转化就可，感受态效率高，仅可见的条带就能长出足够的菌落。做突变不必像TA克隆那样长非常多菌落
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*才随遇长，识以穷精*
9楼2018-03-27 11:30:23
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阿里郎爱阿里

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

浓度太低啦，拿你的第一次PCR产物作模板再跑一锅就好啦，或者其他能增加产物浓度的方法都可以。祝实验顺利~
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10楼2018-03-27 14:33:22
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