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[交流] 糖尿病慢性溃疡动物模型已有1人参与

本期的猪脚是糖尿病这个精神分裂，不过今天要介绍的是糖尿病溃疡伤口模型，进阶详细案例版！跟着我的节奏，一起来！咚次哒次咚次哒次……

首先，要了解糖尿病慢性溃疡的发生机制
糖尿病患者由于发生微血管和周围神经系统病变会导致皮肤营养障碍，出现皮肤受损，激发感染等情况，且一旦感染，创面修复能力极差，容易引起极难愈合的溃疡伤口。

慢性皮肤溃疡是常见的外壳疾病，而糖尿病皮肤溃疡是其中的一种，具有反复发作，长期不愈的特点。糖尿病患者在发生皮肤感染后，会加重糖尿病的症状，并且不容易控制，如果治疗不及时就会向纵深发展，甚至会导致截肢。

本实验首先复制了糖尿病大鼠造模实验，然后在糖尿病大鼠侧后背造成直径2cm的圆形创口建立糖尿病慢性溃疡模型。

那么，实验开始啦
糖尿病大鼠模型的建立1
01实验动物
SD大鼠，体重200-250克，8周龄。
02实验试剂

1）STZ(链脲佐菌素)无色固体2-8℃干燥避光保存，115℃可分解为气体水溶液不稳定，溶于双蒸水或盐溶液。但在低温下pH4-4.5是较为稳定。
2）柠檬酸钠，柠檬酸用于调制缓冲溶液。

03实验器材

1ml注射器，大鼠固定器。

04试剂配制

1）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（pH=4.5.0.1mol/L）配制0.1mol/L柠檬酸钠溶液，在用柠檬酸和氢氧化钠调节pH至4.5。
2）称量140mgSTZ溶解于10ml柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，配制成14mg/mlSTZ溶液。

05动物分组及造模

1）大鼠自由摄食，饮水，动物房保持室温20-25℃，并维持一定的光照。三天后，将大鼠随机分为实验组和对照组。
2）所有大鼠实验开始前12小时开始禁食但不禁水，禁食时间可根据情况顺延至18小时，但不要超过24小时。
3）将配置好的STZ溶液用锡箔纸包裹做避光处理并保存在冰水中，并在配制成功后30分钟内完整注射造模。
4）称量大鼠体重，采用腹腔注射给药进行造模，剂量为70mg/kg。对照组注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。

06模型指标检测

血糖测定：实验过程中腹腔注射STZ 48小时和72小时分段测定大鼠血糖并记录，采用剪尾采血法，使用血糖试纸进行检测。
※两次检测血糖浓度均高于16.8mmol/ml，即可认为造模成功。

07后期饲养

糖尿病大鼠会有很明显的“三多一少”症状，所以尽量分笼饲养，勤换垫料，并保证足够的饲料和饮水供给。

糖尿病大鼠慢性溃疡伤口模型2
01实验动物

SD糖尿病大鼠（八周以上大鼠，并糖尿病造模时间超过1周并少于2周）普通SD大鼠（八周以上，时间相近）。

02实验试剂

1）水合氯醛（或戊巴比妥钠）用于麻醉实验大鼠。
2）医用酒精，表层消毒。
3）龙胆紫（或苦味酸，碘酊）创口标记染液。
4）试纸，标记创口，提前裁成直径为2cm的小圆片，并浸入标记染液中。

03实验器械

手术剪，眼科镊，剪毛剪，（需提前高温灭菌）。

04造模

1）麻醉：
将大鼠称重并按320mg/kg水合氯醛或40mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。

2）创面制作：
1. 将麻醉好的大鼠腹面朝下固定板上，固定四肢，在其背部侧面剪毛备皮，可以偏向背部，避免大鼠抓绕影响实验。
2. 常规消毒，用镊子夹取浸入龙胆紫溶液的直径2cm的滤纸贴于剪毛区，轻按纸片，使大鼠悲伤印上与纸片大小形状相同的标记区域。
3. 用剪刀沿标记边缘线剪去标志区表皮。

3）后期饲养观察：造模后的大鼠单独饲养，注意更换垫料保持环境干燥清洁。造模后，每隔两天，测量伤口直径，计算创面面积，并记录数据，绘制愈合速率曲线。

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