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木星海金虫 (正式写手)
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[求助]
Gateway克隆表达系统的问题
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Gateway克隆表达系统用到的两种反应BP反应和LR反应，为什么只能进行LR反应后将目的基因重组整合到表达载体上进行蛋白的翻译表达？是否可以在PCR的过程中将attB序列加到目的基因上以后，再通过BP反应将目的基因重组到带有attP序列的表达载体上直接进行翻译表达？ 也就是把 step1. attB-目的基因-attB + 带attP序列和ccdB的入门载体（——BP重组反应——>）带attL和目的基因的入门载体+attR-ccdB-attR step2: 带attL和目的基因的入门载体+带attR序列和ccdB的表达载体（——LR重组反应——>）带attB和目的基因的表达载体+attP-ccdB-attP 缩减成一步：attB-目的基因-attB+带attP序列和ccdB的表达载体（——BP重组反应——>）带attL和目的基因的表达载体+attR-ccdB-attR 接触Gateway克隆不久还在学习中, 问题愚拙，还请谅解。期待大家的讨论  |
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Huobol
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木星海2楼2018-03-08 13:34:22
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4楼2018-03-15 11:52:55