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zijing7391

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】转化问题,急!

新手,最近做转化一直都是什么菌都不长,不知道问题出在哪里,请各位高手帮忙分析一下,前几次一直用买的T载体和买的感受态细胞进行转化,也做了对照,结果什么都不长,最近自己做了感受态细胞,还是什么也不长,抗生素浓度用的是100ug/ml,应该怎么检测感受态细胞是不是好用?怎么才能让它长菌啊,郁闷,请各位高手指点!非常感谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-9 at 11:58 ]
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石头1798

新虫 (初入文坛)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~3Q~ 3-18 14:49
wo的具体步骤:
1.将连接产物加入到500Ul的感受态细胞中,冰上放置30min
2.42度水浴60-90s
3.冰上放置1min
4.加入37度预热的培养基800ul
5.37度150转培养60分钟
6.4200rpm离心10分钟
7.吸上清800弃掉,剩下吹散后涂板,37度过夜培养

请作参考!
8楼2009-03-18 08:46:32
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zl382

铁虫 (小有名气)

把你转化的步骤写上来,如实详细地写
你这么说不知道你问题出在哪里了。
后退,绝对是无路可走!
2楼2009-03-12 15:00:46
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zzm7806


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 3-13 09:03
检测感受态是否好用,可以转化阳性质粒鉴定。
具体问题出在哪里,还得看到你的转化步骤才知道
3楼2009-03-13 08:51:30
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

做一个阳性对照,应该能出来,否则就是感受态的问题
最好把你的步骤写出来,看是不是你的转化过程出错了
5楼2009-03-13 13:01:18
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