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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 金属生物材料 » 【请教】细胞吞噬纳米材料的TEM SEM 样品怎么准备？
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sabrinna01

银虫 (小有名气)

[交流] 【请教】细胞吞噬纳米材料的TEM SEM 样品怎么准备？

最近做了些纳米材料，让细胞吞噬进去，想表征一下细胞的TEM,SEM,AFM，具体我该怎么样处理细胞呢？样品如何准备，感谢达人不吝赐教啊

[ Last edited by yusen_1982 on 2009-3-9 at 19:05 ]
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1楼 2009-03-09 15:22:38
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yinmin9521

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
sabrinna01(金币+1):谢谢参与
wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎多多讨论。 3-9 15:58
把材料标记荧光，用荧光显微镜观察。
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2楼2009-03-09 15:30:44
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cpumantiszj

木虫 (小有名气)
★
wgcui(金币+1,VIP+0):谢谢！ 3-9 22:29
楼上正解，好像没听说过细胞还可以或有必要TEM，SEM的。普通光学（带CCD的）显微镜足够了，细胞的尺寸在10um，免疫细胞应该更大点，根本不用电子显微镜，而且材料如果没有独特的信号，拍到的还是细胞外形，根本反应不出材料的信息。我也认为应该对材料进行特定的荧光标记，然后用荧光显微镜观察。
献丑，哈哈
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3楼2009-03-09 20:38:00
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lotus9

木虫 (著名写手)
★ ★
zhangwj(金币+2,VIP+0):谢谢顾问！ 3-9 23:45
SEM和TEM都可以做。SEM可以看细胞吞噬纳米粒子的表观现象；TEM可以看粒子在细胞内的情况，并可对纳米粒子进行电子衍射做定性分析。两者都需要戊二醛和锇酸固定处理，看TEM的话还需要包埋并做超薄切片。如果看纳米粒子进入活细胞的过程，就需要对粒子进行荧光标记，采用激光共聚焦显微镜进行观察。

进行TEM观察也很重要，可以了解细胞吞噬纳米粒子后，纳米粒子对细胞的影响情况，进行机理探讨。用普通的显微镜应该只能看到吞噬纳米粒子后的细胞形态的变化，看不到纳米粒子。

[ Last edited by lotus9 on 2009-3-9 at 23:30 ]
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4楼2009-03-09 23:23:36
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whn732

禁虫 (正式写手)
★ ★
zhangwj(金币+2,VIP+0):谢谢顾问！ 3-9 23:45
SEM的制样之前有个帖子讲的挺细，楼主可以找找。TEM做细胞的话要超薄切片，我也没做过。lz是要看纳米颗粒被吞噬到细胞内部是吧，那SEM能看到吗？估计还是用TEM比较好，但要找到被吞噬的材料可能也比较费劲了。二楼说用荧光标记，这个方法应该比较理想，把纳米粒子用荧光标记，那被吞噬后也可以用荧光显微镜看到。不过能说具体点吗？
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5楼2009-03-09 23:39:15
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refnew

专家顾问 (知名作家)
wgcui(金币+0,VIP+0):谢谢！！欢迎多多交流！ 3-10 09:00
还是做冷冻tem吧，现在染色的很多杂志都不接受了
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6楼2009-03-10 08:32:53
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shenyang24

木虫 (正式写手)
wgcui(金币+0,VIP+0):欢迎常来生物材料版 4-28 08:20
请教：如何让细胞吞噬纳米尺寸的材料？我发现单纯的将纳米材料加到培养基里面与细胞共培养效果不好，纳米颗粒很快沉到培养皿底部，细胞在其表面贴壁生长，细胞毒性结果与阴性对照差异不大。
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7楼2009-04-27 21:56:32
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