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three_sh银虫 (小有名气)
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【求助】请教DNA浓度A260/A280=2.7代表什么
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代表没有蛋白质？有可能有RNA？？不敢肯定。 请教各位大牛。 [ Last edited by yusen_1982 on 2009-3-9 at 14:24 ] |
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2楼2009-03-09 15:06:28
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3楼2009-03-10 08:32:19
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zhangwj(金币+2,VIP+0):谢谢～～ 3-10 12:19
zhangwj(金币+2,VIP+0):谢谢～～ 3-10 12:19
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紫外分光光度法要求核酸样品是纯净的（即无显著的蛋白质、酚、琼脂糖或其它核酸、核苷酸等污染物的制品）。用紫外分光光度计测定260nm和280nm两个波长处的光吸收，然后，按IA260相当于50μg/ml双链DNA。40μg/ml单链DNA或RNA及20μg/ml单链寡核苷酸。计算你的样品含量。260nm和280nm两处读数的比值（A260/A280），可反映核酸的纯度。DNA和RNA纯品的A260/A280的值分别为1.8和2.0如果样品中有蛋白质或酚的污染，则A260/A280将明显低于此值，此时就无法对样品中的核酸进行精确定量。可将样品纯化后再作定量测定。有丰富实验室经验的人，仅凭样品电泳后溴化乙锭染色萤光带的强度，即可大致判断出样品中的核酸含量，故他们常不作核酸的紫外分光光度法定量。 你的这个比值2.7，可能是有个杂质在260nm左右有吸收峰而在280nm附近没有，你可以看看可能引入的杂质中，是否有这类物质。 我也是自己理解的 没有很深理论支持 献丑了，哈哈 |
4楼2009-03-10 10:42:00
three_sh
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6楼2009-03-30 18:22:02