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半点心

金虫 (正式写手)

[求助] GE的16/600 75pg的柱子 压力升高 已有2人参与

我有一根GE的16/600 75pg的柱子,柱体积120ml, 跑了3个样品后,样品buffer为(100mM Nacl, 10mM 磷酸钠)。 之后用水冲洗,开始流速0.5ml/min,柱压0.18Mpa。 走到350ml的时候,柱压升高到0.28Mpa。 是怎么回事呢?换成水后,柱压怎么在一直升高。柱子是新的,才跑了3个样。
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zsygxh

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 半点心 at 2018-03-02 16:13:41
谢谢您的回复,请问下ΔP在哪里看呢。我过的是RNA,是反转录的,体系里面可能有一些蛋白质。但是也不会那么多啊...

在界面上有。那么就不是蛋白沉淀了,而是RNA的问题了,我以前做蛋白和RNA的相互作用,也有碰到过压力升高问题,友情提醒一下,过RNA前务必每次都要用NaOH处理柱子,不然RNA必然会在柱上残留(可能是非特异离子吸附),然后污染下个样品,别问我怎么知道的。

发自小木虫Android客户端
8楼2018-03-02 20:06:52
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dlzhkkk

捐助贵宾 (职业作家)

欢迎交流
2楼2018-02-12 05:57:55
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半点心

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dlzhkkk at 2018-02-12 05:57:55
所有液体是否过滤?

已经过滤了啊

发自小木虫Android客户端
该签名无法显示,系统分析两种可能:一.你需要重新启动电脑;二.你的诚意不够,欲解决,马上邀请该联系人吃饭..
3楼2018-02-23 19:42:45
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家


【答案】应助回帖

一定的体积流速对应一定的压力,增大流速压力升高,这是必然现象。首先你用完柱子后是需要对柱子按照清洗再生的操作方法,洗掉柱子上的非特异性吸附物质,防止柱子填料因为残留样品的原因反压增大,也便于下次使用,延长柱子寿命,再就是要清洗AKTA等纯化系统的管路。至于用水走,压力升高到0.28Mpa,请问对应的体积流速是多少呢?增大体积流速,压力升高也是正常的。AKTA用纯水和0.1M NaCl走柱子(测新填料强度及流速和耐压)在增大体积流速时压力也是会增大的最大可到0.4Mpa,对应的流速会在25ml/min左右。希望对你有所帮助。
4楼2018-02-24 09:21:20
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