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亲爱的不饿

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助 蛋白纯化不出来 每次都有杂带 想哭....已有4人参与

用的康为世纪包涵体纯化试剂盒。binding buffer 中的咪唑浓度为5mM,洗杂蛋白也是5mM的,这次做了梯度洗脱,10,50,100,150,200,250,300,350,500,如下图图一。另一张图是以前用500mM咪唑洗脱的 ,梯度洗脱也洗不到纯的 好想哭,做了两个月的纯化了

求助 蛋白纯化不出来 每次都有杂带 想哭....


求助 蛋白纯化不出来 每次都有杂带 想哭....-1


@biostar2009 @飞约疯人院 @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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Crazy cat

铜虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

有没有跑穿透液。上样纯化之前有没有洗杂?你把详细结果和条件给我看下啊
17楼2018-04-03 17:20:19
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亲爱的不饿

新虫 (初入文坛)

2楼2018-02-05 15:45:14
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亲爱的不饿

新虫 (初入文坛)

表达量也可以 但是一纯化就少

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3楼2018-02-05 15:45:23
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苏氨酸

新虫 (小有名气)

包涵体溶解之前,有没有洗杂?建议用低浓度的尿素2M或4M洗杂

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4楼2018-02-05 15:54:39
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