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Rachel zou新虫 (初入文坛)
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【求助】蛋白纯化，不挂柱 已有1人参与
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原核表达的目的蛋白。载体用的pet28a,表达菌BL21，目的蛋白上清表达。加了6个组氨酸标签，用40mM的咪唑就洗脱了目的蛋白，后来探究了最适洗脱咪唑浓度，结果10mM就洗掉了。关键是杂蛋白也被洗脱了！目的蛋白浓度很高，跑胶条带也清晰，只是杂蛋白太多。求助各位大神！ 发自小木虫Android客户端 |
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yubeihong
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-02-03 04:40:21
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我们也是这个载体表达的蛋白，用purimag镍磁珠纯化还可以。你这个是不上样量太大了？一般低浓度咪唑洗杂，高浓度咪唑洗脱。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2018-02-02 16:07:40